离子交换层析柱Q6

一文搞定纯化实验 7 大常见问题！

择离子交换层析...... 遇到这些问题别担心，「纯化密卷」来帮忙！！ 在这份 CIPP（Capture, Intermediate purification，Polishing，层析策略）纯化密卷中，我们对大家纯化过程中遇到的常见问题，一一做出了解答，更有九大层析策略，让专业的人帮你搞定一切困难～ 生物分子间的分离纯化主要依据分子间在物理和化学性质上的差异来实现的，包括大小、电荷、疏水和极性等，部分蛋白还具有特殊的亲和特性。另外，可以综合利用多种不同的性质差异，采用特殊的「多模式填料

离子交换层析

填料 离子交换层析填料主要有基架和配基两部分组成，其中基架的类型和粒径大小决定了填料的耐压、流速、分辨率等，粒径越小，填料的分辨率越高，而同等高度的层析柱带来的反压也相对较大，而配基是实际和样品中生物分子结合的基团。 离子交换填料的配基根据离子交换层析类型的不同分为阴离子交换配基及阳离子交换配基，常见的离子交换填料配基类型 （如表6)，在离子交换填料选择时，优先考虑强离子交换配基，如阴离子配基Q、阳离子配基S等，如果强离子交换配基无法得到满意的结果，也可以考虑使用弱离子交换配基为层析带来不同的选择

膜蛋白纯化攻略分享

本身不带标签，则需要使用离子交换层析。 离子交换层析 离子交换层析推荐使用 RESOURCE 和 Capto HiRes 系列，能得到比较好的分辨率。不过要注意阴离子交换实验中不要添加阴离子型去垢剂，阳离子交换实验中则不能加入阳离子型去垢剂，以免影响层析柱载量。 离子交换之前需降低缓冲液中盐浓度，由于膜蛋白的特殊性，推荐使用脱盐柱进行此步骤，根据样品体积可选择 HiTrap Desalting 5 mL 或 HiPrep 26/10 Desalting 53 mL 两种常用柱型。最终上样体积不要超过