独立包装HRP比色底物，DAB

组化染色背景高？没信号？一篇文章带你快速掌握免疫组化！

素与生物素高度特异性结合的关系来放大免疫组化信号，但此方法有产生内源性生物素背景的可能性。而酶标聚合物法，利用聚合物与二抗结合，形成聚合物-二抗复合物，实现信号放大，该方法不受内源性生物素的干扰。 表 2 免疫组化多种检测系统分类 图 2 酶标聚合物法检测系统 图 3 链霉亲和素-生物素法检测系统 在显色法中，针对 HRP（辣根过氧化物酶）显色系统，其常用底物为DAB/AEC（HRP/DAB 呈棕褐色染色，具有很好的光稳定性，HRP/AEC 呈红色染色，在阳光下会褪色，不易保存。 基础 IHC

ELISA 实验操作要点

本底值增高。OPD 底物液受光照会自行变色，显色反应应避光进行，显色反应结束时加入终止液终止反应。OPD 产物用硫酸终止后，显色由橙黄色转向棕黄色。 TMB 受光照的影响不大，可在室温中置于操作台上，边反应边观察结果。但为保证实验结果的稳定性，宜在规定的适当时间阅读结果。TMB 经 HRP 作用后，约 40 分钟显色达顶峰，随即逐渐减弱，至 2 小时后即可完全消退至无色。TMB 的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠（SDS）等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间（12-24

培养细胞的免疫酶标抗体染色法

培养细胞的免疫酶标抗体染色法       免疫酶组织化学技术是以酶作为抗原抗体反应的标记物，酶催化相应的  底物，形成一种不溶性的反应产物。光镜观察时，要求形成的终产物为不溶性的有色沉淀，  而电镜观察时，则要求酶反应的终产物经适当处理后，具有较高的电子密度。辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)是目前应用最多的酶标记物，具有稳定性强和酶反应特异性高等优点。         1)0．1mol／LPB(pH 7．2)配制的4％多聚甲醛原位固定(4℃