转印包，Mini，PVDF膜，10次

各类western转膜条件

蛋白分子量：55 KD WB用膜类型、孔径：0.22的PVDF膜 转膜方式（恒流）：湿转 转膜时间：60-90 min 设备：“Bio-Rad mini” 建议：转膜液用过两三次之后转膜效果就很差了 其它按照常规就好了 其实0.22的膜一般不怕转过头 以我们的经验，转膜时间、电压

Western Blot中的三大问题

转膜效率低：转膜效率受多种因素影响，包括蛋白的大小、凝胶中丙烯酰胺的百分比、电场强度、转印时间和缓冲液的PH值。一般来说，蛋白越大，转移的越慢。转移大蛋白最好的方法是用高的电场强度。而小蛋白长时间处于高电场强度下可能会传出转印膜。避免这个问题的方法是用0.2μm孔径的PVDF膜进行转印。如果蛋白的等电点接近缓冲液的pH值，那么这个蛋白携带的电荷很少，在电场中页几乎不移动。如果你的目的蛋白是强碱性的，那么你可以用碳酸盐(pH9.9)、CAPS(pH11)及酸性缓冲液。 在转印之后

western blotting的转膜步骤

相关专题   下面的步骤适用于通过XCell Ⅱ转印系统进行蛋白印记的大部分应用。为达到最佳效果，用户的优化是必要的。 I. 所需材料： •Xcell SureLock™或Xcell Ⅱ™ Mini-Cell以及Blot Module（Cat. Nos. EI10001, EI9001及EI9051）•电泳后的迷你胶（mini-gel）（最大的尺寸9cm*9cm）•预先切割好的印记膜： 硝酸纤维素（Cat. no. LC2000或LC