两性电解质，pH5-7，40%，10ml

聚丙烯酰胺凝胶平板等电聚焦电泳测定蛋白质等电点（图）

点聚焦电泳产生pH梯度的方法有两种：一是用两种不同的pH缓冲液相互扩散，在混合区形成pH梯度，此为人工pH梯度。这种pH梯度不稳定，常用于制备电泳；另一种是利用载体两性电解质在电场作用下形成自然pH梯度。本实验就是利用载体两性电解质形成的自然pH梯度进行蛋白质样品等电焦聚电泳的。理想的载体两性电解质应该在其本身的等电点处有足够的缓冲能力和良好的导电性，且分子量要小，组成与被分析样品有所区别，对分析样品无变性作用或发生化学反应。常用的载体两性电解质是一系列脂肪族多氨基和多羧基类的混合物，即是一系

蛋白质的性质实验:蛋白质等电点的测定和沉淀反应

一、蛋白质等电点的测定 1、目的 （1）了解蛋白质的两性解离性质。 （2）学习测定蛋白质等电点的一种方法。2、原理 蛋白质是两性电解质。蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱 度影响。当溶液的pH 达到一定数值时，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等， 在电场中，蛋白质既不向阴极移动，也不向阳极移动，此时溶液的pH 值称 为此种蛋白质的等电点。不同蛋白质各有其特异的等电点。在等电点时，蛋 白质的理化性质都有变

电泳技术

200V/cm时为高压电泳。电场强度大，带电质点的迁移率加速，因此省时，但因产生大量热量，应配备冷却装置以维持恒温。⒉溶液的pH值 溶液的pH决定被分离物质的解离程度和质点的带电性质及所带净电荷量。例如蛋白质分子，它是既有酸性基团（-COOH），又有碱性基团（-NH2）的两性电解质，在某一溶液中所带正负电荷相等，即分子的净电荷等于零，此时，蛋白质在电场中不再移动，溶液的这一pH值为该蛋白质的等电点（isoelctric point，pI）。若溶液pH处于等电点酸侧，即pH＜pl，则蛋白质带正电