电泳缓冲液，20x，SSC，5L

如何做好 Southern 杂交？

大于 109 计数/分/μl。六、杂交Southern 杂交一般采取的是液-固杂交方式，即探针为液相，被杂交 DNA 为固相。杂交发生于一定条件的溶液（杂交液）中并需要一定的温度，可以用杂交瓶或杂交袋并使液体不断的在膜上流动。杂交液可以自制或从公司购买，不同的杂交液配方相差较大，杂交温度也不同。下面给出的为一杂交液配方：PEG 6000 10%；SDS 0.5%；6×SSC；50% 甲酰胺。 该杂交液的杂交温度为 42 ℃。1．预杂交NC 膜浸入 2× SSC 中 5 min，在杂交瓶中加入杂交

RNA琼脂糖凝胶电泳实验原理、试剂配制方法及操作流程

。 吗啉代丙烷磺酸(MOPS) 0.4mol/L(pH 7.0) NaAc 0.1mol/L 乙二胺四乙酸(EDTA) 10mmol/L (3)50mL变性琼脂糖凝胶(1%) (4)10x电泳缓冲液 5 mL 琼脂糖 0.5 g 0.1%DEPC水 36.5 mL 加热溶解，稍冷却，加入8.5 mL 37%甲醛。 (5)上样缓冲液：50%甘油，1mmmol/LEDTA，0.4% 溴酚兰，0.4%二甲

分子杂交——Northern基因检测

1. 总RNA提取 2. 变性胶的制备：取琼脂糖0.2g，加入DEPC H2O 12.4ml，加热熔化，于保温状态下加入5×甲醛凝胶电泳缓冲液4.0ml、37%甲醛3.6ml，混匀、制胶。待胶凝固后，置1×甲醛凝胶电泳缓冲液中预电泳5min。 3. 样品制备：取总RNA 30μg，加入甲醛4.0μl、甲酰胺12.5μl，上样缓冲液2.5μl。65℃温育15min，迅速冰浴5min。然后加入5×甲醛凝胶电泳缓冲液 4.0μl