电泳缓冲液，10x，Tris/Glycine，1L

蛋白分离的不连续缓冲系统的比较

在电泳开始的时候，SDS-PAGE 利用不连续系统，在浓缩胶中浓缩或"堆积"样品，使其成为一条非常锐利的区带。在不连续缓冲系统中，最初胶中的阴离子不同于（或不连续）电泳缓冲液中开始时的阴离子。NuPAGE系统（Bis-Tris和Tris-Acetate）和Laemmli(Tris-Glycine)系统二者均为不连续系统的例证，以相同的方式起作用。但是，作为NuPAGE系统中不同离子的结果，这个系统在一个较低的pH值下工作。Tris-Glycine系统（图1）的情况，主要包括三种离子： a)氯

原创：western protocol

buffer: 1 L 30.3 g Trizma base (= 0.25 M) 144 g Glycine (= 1.92 M) pH should be 8.3; do not adjust To make 1L of 1x Blotting buffer: 200 ml Methanol 100 ml 10x Blotting buffer 700 ml water Blocking buffer: 0.5 L 5%No fat milk or 3% Bovine serum

垂直电泳槽的使用

ml的1M Tris-CL，pH值为6.8（Sigma），25 μl浓度为10％的SDS（Bio-Rad），25 μl浓度为10 ％的APS（Bio-Rad），2.5 μl的TEMED（Bio-Rad） •10X Tris-Glycine缓冲液（Sigma） •V-GES灌胶模具（Wealtec） •V-GES电极与电泳槽（Wealtec） •制冷恒温金属浴（Wealtec） •恒温金属浴（Wealtec） •胶铲（Wealtec） •考马斯蓝染色缓冲液（浓度为0.1％