电泳缓冲液，10x，TBE，1L

RNA琼脂糖凝胶电泳实验原理、试剂配制方法及操作流程

量成正比。 判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱 应可清晰看到18s rRNA、28s rRNA、5s rRNA的三条带，且28s rRNA的亮度应为18s rRNA的两倍。 三、材料、试剂及器具 1、 材料 总RNA提取 物。 2、 试剂 (1)0.1%DEPC水：200ml双蒸去离子水加0.2mlDEPC焦炭酸、二乙酯混匀，室温放置过夜，高压灭菌。 (2)10x电泳缓冲液

RNA琼脂糖凝胶电泳实验操作步骤与注意事项

的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时，一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时，配制普通的1%琼脂糖凝胶即可。 三、实验材料、器具及药品 蘑菇的总RNA溶液。 电泳仪，电泳槽，电子天平，移液器，枪头，微波炉，紫外透射检测仪等。 琼脂糖，1XTAE电泳缓冲液，0.5μg/ml溴化乙锭(EB)10X载样缓冲液。 四、实验步骤 (1)用1×TAE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶，加1×TAE

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

和运行时可作为样品的pH 指示剂（图 3A）。常用染料包括溴酚蓝、二甲苯青、苯酚红、和橙色 G。选择上样缓冲液时,需注意染料的表面迁移（s）（图 3B, 表 5 和 6）以避免遮盖目的核酸条带,特别是分子大小接近时（图 3C）。染料遮盖会影响目的条带的分析和量化，导致结果不可靠。 图 3. 中性pH中染料颜色。（B）在 TAE 和 TBE 缓冲液中不同百分比琼脂糖里的染料迁移。（C）在可视化过程中染料阴影遮盖条带。 3. 运行电泳 在凝胶、标准品和样品制备后，进行电泳。拆卸梳子和添加电泳缓冲液