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上海希言科学仪器有限公司
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文献和实验; 2)DNM T3a、DNM T3b从头甲基转移酶, 它们可甲基化CPG, 使其半甲基化, 继而全甲基化。从头甲基转移酶可能参与细胞生长分化调控, 其中DNM T3b在肿瘤基因甲基化中起重要作用。三、 相关图解四、 DNMT的抑制剂Decitabine:Decitabine是一种DNA甲基化的有效抑制剂,作用于HL-60和KG1a细胞时,IC50分别为100 ng/mL和1 ng/mL。Lomeguatrib:Lomeguatrib是一种有效的O6-alkylguanine-DNA
加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板,次日上午加药.一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔.建议设5个,否则难以反应真实情况3.5%CO2,37℃孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。4.每孔加入20ulMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用PBS冲2-3遍后,再加入含MTT的培养液。5.终止培养,小心吸去孔内培养液。6.每孔加入150ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。在酶联
萘酚贮存液的准备:用 10 mL 无水乙醇溶解 0.3 g 氯萘酚,贮存于 -20℃; (2) 加 100 μL 氯萘酚贮存液至 10 mL 0.05 mol/LTris(pH7.6); (3) 加0.1 mL 3% 过氧化氢于水中。过氧化氢一般是以 30% 的溶液提供,4℃ 可存放 1 个月; (4) 白色沉淀可用滤纸过滤去除; (5) 加此溶液到标本中,并在室温孵育 10~40 min,水洗终止反应; (6) 优化:如果需要,进行复染,但只可使用水溶性染料; (7) 用 Gelvatol
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