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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 细胞类型:
科研
- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
25T
细胞常规说明:
培养条件:89%基础培养基+10%FBS+1%双抗
冻存液成分:10%DMSO+40%FBS+50%基础培养液
细胞质检情况:不含细菌、真菌、支原体等微生物污染
传代建议:1:2~1:3传代,2~3天换液1次
特别提醒:签收细胞后,如细胞状态不佳,或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系,以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据,请务必重视。
悬浮细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室
2.拧松瓶盖,细胞瓶竖立培养8h(或过夜)
3.待细胞沉底后吸除上层液体(含碎片残渣,请小心操作),然后吸取沉底的细胞层(2ML左右转移到新的培养瓶,加入新鲜的完全培养基(如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%)继续培养
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀
2.吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿
3.分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基,使细胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培养基PH值变化情况和细胞密度,定期半量换液(每周2-3次),待细胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重复1项操作或者冻存
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜完全培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存
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文献和实验Ribozyme as an approach for growth suppression of human pancreatic cancer
. The anti-K-ras ribozyme significantly reduced cellular K-ras mRNA level (GUU-mutated codon 12) when the ribozyme was transfected into the Capan-1 pancreatic carcinoma cells. The ribozyme inhibited proliferation of the transfected Capan-1 cells
蛋白组学文章1篇:胰腺癌患者门静脉血清的Maldi-TOF分析 希望斑竹加我第一分啦
血糖浓度高于7.0mmol/L,或根据口服糖耐量试验诊断。 2. 细胞系和细胞培养 MIA PaCa2和PANC-1(来源于人原发性胰腺腺癌)、CAPAN-1(来源于人胰腺转移癌)和正常人纤维母细胞(来源于接受隐静脉切除术者的被切除的隐静脉)在培养基中进行培养,培养基中含低糖(5.5 mM)DMEM、10%FCS、2%谷酰胺和0.1%庆大霉素。细胞(约100,00/每烧瓶)接种于含10ml DMEM的75cm2烧瓶内,培养6天后,取出培养基并以200×g离心10分钟,收集上清液(条件培养液)作质普分析备用
点突变激活的癌基因的理想武器。K- ras 基因成为第一个采用RNAi 技术敲除的癌基因。ras基因是目前已知在人类肿瘤中最普遍呈活化状态的致癌基因,此基因的突变現象存在于30-50%的肿瘤组织中,在胰腺癌可达85%。突变的ras 基因与正常细胞中的野生型ras 基因通常只有一个碱基的不同,但由于RNAi 的高度特异性,可以针对肿瘤细胞中突变的ras产生抑制作用,而对正常细胞中的野生型ras不产生抑制作用。Agami研究组采用逆转录病毒载体shRNA表达系统不仅特异性地在体外抑制了CAPAN-1胰
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