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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2—25℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Antibiotic Agar No.1
- 库存:
50
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
250g
英文名称:Antibiotic Agar No.1
产品规格:250g
产品用途: 用于磺苄青霉素效价测定
用途:用于磺苄青霉素效价测定。
成分(g/L)
蛋白胨 5.0
牛肉浸粉 3.0
磷酸氢二钾 3.0
琼脂 15.0
抗生素检定培养基1号(低PH)pH值6.5- 6.6 25℃
1、 液体培养基:把培养基配好,液体一般5mL就装试管,50mL-100mL就装到100mL的三角瓶中,高温高压灭菌后待用。和细胞培养不一样的地方就在于,三角瓶和试管由于装了培养基要灭菌,瓶塞需要做棉塞或用膜等透气的东西封口。这些东西直接找有做过的实验室去弄点就行了,自己现做什么的也怪麻烦的。
抗生素检定培养基1号(低PH)固体培养基:在液体培养基中添加一定浓度的琼脂,一般是100mL装瓶,或者是200mL装瓶(装500mL的三角瓶),灭完菌后,在培养基温度降到一定程度,培养基还呈溶液状态的时候,就在超净台加抗生素倒平板。不过别太凉,不然琼脂就凝固成块块了。当然,灭好菌后,也可以等到要用的时候再倒平板,倒之前微波炉加热,溶解琼脂,冷却到一定温度再倒就行。(建议如果以前从来没弄过固体培养基,也找个人替你操作几次)这部分的内容,可以去找一本本科的微生物实验手册看看就行。
2、冻干粉比较好保存,所以在培养基全部准备好之前不用去管冻干粉,扔冰箱就行。都准备就绪以后,直接用500-1000uL的培养基溶解干粉,浓度高,接活率高。然后有几种方法可以选择:
1).直接将溶好的菌取5-10uL加入到5mL 液体培养基(已经加了抗性)中,37C摇床培养。根据你的冻干粉保存的时间,一般7,8个小时就能看见有没有长了。
2).为了防止接菌量太少,导致菌体不生长,可以取50-100uL的菌液加入到50mL液体培养基中,37C摇瓶培养,这个按说应该会长得比较快一点,因为通气量大。所以你可以都接上,看情况。
3).还有为了防止污染,会直接取菌液在固体培养基上划线,这样长出来的是单菌落,根据菌落大小和形态,就可以避免取到污染的菌体。但是这种方法风险最高,因为接菌量小,如果菌体活力稍弱,就容易完全不长。
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文献和实验广泛、生长迅速和体积大小等特点,细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到;受感染的培养物通常会变得浑浊,有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的 pH 值突然下降的情况。在低倍显微镜下,细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间,在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的 293 细胞被大肠杆菌污染。 酵母 酵母是真菌界中的单细胞真核微生物,大小从几微米(常见)到 40 µm(罕见)不等。与细菌污染一样,被酵母
体积的 1%(有资料说不大于 2%)。如果加入菌悬液的体积过小,则在同次实验中,不同次加入菌悬液的体积相差较大, 造成实验误差;如果加入菌悬液的体积过大,则会使上层培养基变稀,并且因菌悬液的温度较低,加至培养基中可能造成培养基结块,影响测定结果。对于加入菌悬液体积的控制,可通过调节菌悬液的浓度来实现。下面为在海博生物技术公司生产的抗生素检定Ⅳ号琼脂上,莫能菌素对短小芽孢菌的抑菌效果:图 a 连续培养 7 天的短小芽孢菌图 b 莫能菌素对短小芽孢菌的抑菌效果从照片可以看出,菌悬液中芽孢率符合要求(≥ 85
一、目的和要求 1. 了解管碟法的原理。2. 掌握二剂量法测定抗生素效价单位的技术和计算方法。二、原理抗生素的生物检定是以抗生素对微生物的抗菌效力作为效价的衡量标准,具有与应用原理相一致、用量少和灵敏度高等优点。管碟法是琼脂扩散法中的一种,已被各国药典广泛采用,作为法定的抗生素生物检定方法。当抗生素在菌层培养基中扩散时,会形成抗生素浓度由高到低的自然梯度,即扩散中心浓度高而边缘浓度低。因此,当抗生素浓度达到或高于MIC(最低抑制浓度)时,试验菌就被抑制而不能繁殖,从而呈现透明的抑菌圈。根据扩散
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