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康朗生物
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20次
预染蛋白质Marker(18~94kDa)
规格:20次产品简介: 预染蛋白质Marker为几种蛋白质分别纯化预染后混合而成的蛋白质溶液,这些蛋白混合物与蓝色或彩色染料共价偶联,可在凝胶电泳时出现强度均匀的蛋白带,可以直接观察蛋白电泳及判断Western转移效果。同未预染的蛋白标准相比,预染蛋白Marker 因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变。如果要精确判定分子量,推荐将我公司的非预染蛋白质Marker与预染蛋白Marker配合使用。 产品特点: 适合于12%-15%SDS-PAGE 电泳。无需加热,直接上样,使用更方便。 适用范围: 蛋白质凝胶电泳和蛋白质转移(从胶上到膜上)。 保存条件: 短期内多次使用置于4℃,-20℃保存一年。
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文献和实验相关专题 蛋白Marker可分为:一、未预染的Marker即宽分子 量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。 在western blot 过程中,分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节,然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个 Western Blot参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小,只有标准量
除(图 14)。 除去上层胶,用考马斯亮蓝溶液染色下层分离胶15分钟。 •将凝胶置于脱色缓冲液过夜震荡进行脱色。 •通过Dolphin-Doc凝胶成像分析系统的紫外/白光转换板拍照。 结果 图1. 电泳后的凝胶。左边外侧孔装载预染色marker,右边两个外侧泳道装载Pro-marker。中间的孔装载1 mg/ml的牛血清白蛋白 (BSA)。浓缩胶部分已被除去。 备注 •在12%的分离胶中用恒定电压输出设置对样品进行分离, BSA(66.2 kDa)被精确地分离到相
转印——转印效率对WB结果的影响并不如书本和网络上宣扬的那么大!首先必须澄清的是,很多时候新手会把WB结果无信号归咎于转膜不够充分,实际上转膜效率对最终结果的影响所占比重并不高,真正取决定性因素的是抗体识别能力的强弱,以及如何正确使用抗体,这个问题下节讨论。有一个简单的例证,Biorad提供的3mm厚滤纸初次使用时,通常转膜效果不理想(从预染的marker深浅可知),但对多数一般丰度的蛋白的检测没有任何影响(建议少用这种新滤纸做那种含量特别稀少或者转膜非常困难的蛋白)。没有很好的策略可以解决
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