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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
一年
- 库存:
683
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100ml/500ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京XH084型抗原修复液(EDTA型)(50X)说明书由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多抗原修复液(EDTA型)(50X)等细胞及免疫学产品请联系我司咨询订购。
名称:北京XH084型抗原修复液(EDTA型)(50X)说明书
品牌:百奥莱博
规格:100ml/500ml
编号:XH084
产地:国产|进口
产品简介:
EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval Solution)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液采用了广泛使用的EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。储存条件:2~8℃,有效期一年。
使用说明:
使用前请用双蒸水将原液(50X)稀释50倍成(1X),1X抗原修复液为工作液
1. 对于石蜡切片:
a. 脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。
b.抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
2. 对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100℃加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
更多有关北京XH084型抗原修复液(EDTA型)(50X)说明书的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·总RNA提取试剂盒
编号:XH011
规格:50T/100T
原理简介
本试剂以本公司所产总RNA提取试剂(TRIzol)为基础,结合玻璃奶核酸吸附技术,使最终提取的RNA试剂纯度更高。
注意事项
1. 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。
2. 使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3. 所有离心步骤最好用低温离心机在4℃条件下离心,如果实验室没有低温离心机,也可以使用常温离心机,但所提得的RNA可能会降解严重些。
操作步骤
准备工作:使用前请先开启一瓶新的无水乙醇,倒入漂洗液中,倒满至离瓶口约0.5-1ml,盖上瓶口,摇匀。
1.样品处理:
a,植物组织:以叶片RNA提取为例。取新鲜叶片在液氮中充分研磨,随后把研磨后的粉末迅速加入到裂解液中。大约50-100mg叶片使用1ml 裂解液。
b,动物组织:以鼠肝脏RNA提取为例。取新鲜或-70℃冻存组织,大约10-30mg组织加1ml裂解液,用一次性组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
a,单层培养细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每10cm2面积加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
c,细胞悬液:离心收集细胞。每5-10×106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液。
d,血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置2分钟,8,000-10,000rpm 离心1分钟。彻底吸弃上清,收集白细胞沉淀。每200 ul血液收集的白细胞沉淀加入1 ml裂解液。
2.混匀,将匀浆样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
3.向匀浆样品中加0.2ml氯*(代"仿"),盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟,使其自然分相。如不能旋涡混匀,可手动颠倒混匀2分钟代替。
4.2-8℃ 12,000 rpm离心10分钟。样品会分成两层,RNA主要在上层的水相中,把水相(通常为500μl)转移到新DEPC处理管中。如果上清还有沉淀,可再次离心。
5.玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入800ul漂洗液,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,再用600ul漂洗液洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟,加入50-100ul洗脱缓冲液混匀溶解,静置5分钟。离心,取上清为所提RNA。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
北京XH084型抗原修复液(EDTA型)(50X)说明书关键词:抗原修复液(EDTA型)(50X),XH084,百奥莱博
·细胞核提取试剂盒
编号:XH064
规格:50T/100T
二,说明
细胞核提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的细胞核。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的细胞核的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。产品不含污染性蛋白酶和核酶,性能稳定。
三,操作步骤
1. 样本处理
a. 组织匀浆:称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等,PBS或生理盐水冲洗,洗净血水,滤纸吸干,用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL预冷的Lysis Buffer,再加入50ul Reagent A , 0℃冰浴中上下研磨组织20次;有未研磨开的组织,可用双层纱布过滤。
b. 培养细胞匀浆:消化细胞,PBS洗涤,800 × g 5~10 min离心收集细胞。计数。每次提取需要5 × 107个细胞,加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞,再加入50ul Reagent A,将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内,0℃冰浴研磨细胞20~30次。
2. 将组织或细胞匀浆物转移到1.5ml离心管中,4℃,700× g 离心5 min。细胞核沉淀在收集管底部。加入0.5 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬沉淀;
3. 取另一新离心管内加入0.5 mL Medium Buffer,吸取上一步的重悬液,沿管壁小心地加入到此离心管中,置于Medium Buffer之上,4℃, 700 × g 离心5min。将上清转移到新离心管,细胞核沉淀在管底;
5. 弃上清,在细胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重悬细胞核沉,1000 × g 离心10min ,弃上清,得较纯的细胞核沉淀;
6. 用50-100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬细胞核沉淀,立即使用或-70℃保存。
四 注意事项:
1. 为保证获得完整的细胞核,第一是全程低温操作。第二是快速。第三,在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备细胞核的最关键环节。与组织块相比,培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁,因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2. 以离心力g计算正确的离心速度,不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳,可直接加入上样缓冲液裂解细胞核。
五 储存:四周内使用可4℃储存,长期置-20℃
转速与离心力换算
G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;
[rpm] 2即:转速的平方; R为半径,单位为厘米。
北京XH084型抗原修复液(EDTA型)(50X)说明书关键词:抗原修复液(EDTA型)(50X),XH084,百奥莱博
PY02-189 吲哚培养基 10克
5934-29-2 L-Histidine L-组氨酸盐酸盐
ARB10599 人血小板活化因子(PAF)酶免分析 Human platelet activating factor,paf ELISA KIT
4-硝基苯甲酸 Lysostaphin 62-23-7
多聚左旋赖氨酸 D-Aspartic acid 25988-63-0
无水三氯化钌 2,4-Dinitrobenzoic acid 10049-08-8
BL0910 FITC标记兔抗Avidin抗体
BTN100827 菌种保存液 Stain Storage Soluiton
ARB12592 大鼠基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)尿液中含量检测 Rat matrix metalloproteinase 8/neutrophil collagenase,mmp-8 ELISA KIT
SJ0820 溴百里香酚蓝
ARB13929 猪肾上腺素(EPI)Elisa定量检测 Porcine epinephrine/adrenaline,epi ELISA KIT
ARB13820 豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)酶联免疫定量检测 Guinea pig tissue inhibitors of metalloproteinase 1,timp-1 ELISA KIT
肌氨酸甲酯盐酸盐 Amygdalin 13515-93-0
BTN130645 8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶 OGG1(8-Oxoguanine DNA Glycosylase)
ARB14100 人精浆弹性硬蛋白酶代做ELISA实验
ARB10710 人多肽YY(Peptide-YY)ELISA检测服务 Human Peptide yy ELISA KIT
002012 枸橼酸纳抗凝兔血 100ml|500ml
4-氨基苯乙酮 TRIS acetate salt 99-92-3
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文献和实验,旋转“校正”旋钮,使电流表调到满度(50μA),然后将选择开关置于“测量”位置。 10、适当调节搅拌旋钮,使反应瓶中的液体在搅拌的作用下旋转。 (二)、测量方法: 1、滴定甲醇的水份:(确定终点) 用手按动滴定管上的滴定玻璃珠,用卡尔-费休试剂滴定甲醇中的水份,此时电流表指示数值开始上升,随着卡尔-费休液不断滴入,电流表指示数值会逐步增大,反应瓶中的液体颜色也会由浅色转为棕色,当电流表接见45μA~48μA处,并基本不变,即可认为此值为滴定终点值。 2、标定卡尔-费休试剂: 用双
人III 型前胶原(PC-III ) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中III 型前胶原(PC-III )的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 人 III 型前胶原( PC-III ) 水平。用纯化的 人 III 型前胶原( PC-III )抗体 包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中
),请先用样品稀释液稀释一定倍数( n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数( ×n ×5 )。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6. 底物请避光保存。 7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准 . 8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9. 本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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