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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 库存:
540
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50次
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
RFT057型BCA蛋白定量试剂盒大量库存促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多BCA蛋白定量试剂盒等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:RFT057型BCA蛋白定量试剂盒大量库存促销
规格:50次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
● 试剂盒内容及保存:产品名称 包装 贮存方式
BCA试剂A 100 ml RT
BCA试剂B 3 ml RT
牛血清白蛋白(BSA)标准溶液(5 mg/ml) 2×1 ml -20℃
PBS溶液 10 ml 4℃
说明书 1份
● 储存条件和效期:试剂A和试剂B室温贮存;牛血清白蛋白标准溶液-20℃贮存;PBS溶液4℃贮存。本试剂盒有效期1年。
● 产品简介:
BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是蛋白质分子中肽键结构在碱性环境下能与Cu2+生产络合物,并将Cu2+还原成Cu+,而BCA试剂可以特异性地与Cu+结合,形成稳定的有颜色的复合物,并在562nm处有最大的光吸收值,该复合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,可以根据吸收值的大小来测定蛋白的含量。
本试剂盒可以检测500个样品(使用微孔板)或50个样品(使用试管)。
● 产品特点:1. 灵敏度高,检测浓度下限达到25μg/ml(在20-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系),最小检测蛋白量达到0.2μg,待测样品体积为1-20μl。
2. BCA法测定蛋白浓度的最大优点是蛋白浓度的测定可以耐受高浓度的去垢剂,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween 20, 60, 80。但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇低于1mM,β-巯基乙醇低于0.01%。
● 操作方法
BCA工作液配制:将试剂A和试剂B按照体积比50:1比例混合,配成BCA工作液。
如,取50ml 试剂A与1ml试剂B混合,配成51 ml BCA工作液。
注:BCA工作液室温可放置一周不失效。
微孔板测定程序:(工作范围20-2000 μg/ml)
1. 蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取20μl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液用PBS溶液稀释至100μl,使其终浓度为1.0 mg/ml。
2. 按照下表配制BSA标准测定溶液:编号 0 1 2 3 4 5 6 7 8
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl 5 mg/ml BSA 标准溶液 μl
BSA标准溶液 μl 0 0.5 2.5 5.0 10 15 20 6 8
PBS 溶液 μl 20 19.5 17.5 15 10 5 0 14 12
BSA终浓度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000
总体积 μl 20 μl
3. 将适当体积的待测样品加入到微孔板中,并用PBS补足到20 μl
4. 向微孔板中加入200 μl BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
注:也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
5. 测定562 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6. 以A562为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。
试管测定程序:(工作范围20-1000 μg/ml)
1. 蛋白标准品配制:室温完全溶解蛋白标准品,取150μl 5mg/ml BSA蛋白标准溶液,加入600μl PBS溶液稀释至750μl,使其终浓度为1.0 mg/ml。
2. 按照下表配制BSA标准测定溶液:编号 0 1 2 3 4 5 6 7 8
1 mg/ml BSA 标准溶液 μl 5 mg/ml BSA 标准溶液 μl
BSA标准溶液 μl 0 2.5 12.5 25 50 75 100 30 40
PBS 溶液 μl 100 97.5 87.5 75 50 25 0 70 60
BSA终浓度 μg/ml 0 25 125 250 500 750 1000 1500 2000
总体积 μl 100 μl
3. 将适当体积的待测样品加入到试管中,并用PBS补足到100 μl;
4. 向试管中加入2ml BCA工作液,混匀,37℃放置30分钟;
注:也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
5. 测定562 nm 处的吸光值,并记录读数;以不含BSA 的样品的光吸收值作为空白对照。
6. 以A562为纵坐标,BSA含量为横坐标,绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。如果所得到的蛋白浓度不在标准曲线范围内,请稀释样品后重新测定。
关于RFT057型BCA蛋白定量试剂盒大量库存促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·植物基因组提取试剂盒
编号:RFT038
规格:50次
● 储存条件和效期:本试剂盒在室温(25℃左右)干燥条件下,可保存1年;更长时间的保存可置于2–8℃。2–8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,应在使用前置于37℃下溶解沉淀至溶液澄清后再使用。单独包装的RNaseA收到后-20℃保存。
● 产品简介:
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,能提取多种植物细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA*(代"片")段大,纯度高,质量稳定可靠。
使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
● 提取得率:材料 DNA得量(μg/100mg)
Arabidopsis 3–4 μg
Barley 8–12 μg
Maize 15-20
Pine 20-25
Potato 4-6
Rape 2-4
Spinach 5-10
Tobacco 20-25
Wheat 25-30
● 准备工作:1. 准备液氮;65℃水浴;无水乙醇;1.5ml灭菌离心管。
2. 按照标签所示在缓冲液AP3和漂洗液PW中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3. 每次使用前请检查缓冲液AP1,缓冲液AP2和缓冲液AP3是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
● 操作步骤:如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1. 取适量植物新鲜组织500mg-1g加入液氮充分研磨,取约100mg粉末置于1.5ml离心管中,加入400 μl 缓冲液AP1和6 μl RNaseA (10mg/ml),漩涡震荡1分钟。
2. 将离心管放在65℃水浴10分钟,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
3. 加入130 μl 缓冲液AP2,颠倒混匀,冰浴5分钟。
4. 12,000rpm离心5分钟。
注:此步骤离心去除去垢剂,蛋白以及多糖等杂质。
5. 取上清(通常为400 μl)转移到过滤柱CF中,12,000rpm 离心1分钟。
6. 将滤出液转移到1.5 ml离心管中,加入1.5倍体积(例如400 μl的上清液加600 μl缓冲液AP3)缓冲液AP3(使用前请注意是否已经加入无水乙醇),立即颠倒混匀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。
7.吸取步骤6中的混合液加入到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中),12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放回收集管中。
注:离心吸附柱的最大容积是700μl,如果一次不能完全上柱,可以分次上柱离心,保证全部溶液全部加到离心柱中。
8.向吸附柱CG中加入500 μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
9.重复步骤8。
10. 可选步骤:如果离心柱的吸附膜上有颜色,向吸附柱CG中加入500 μl无水乙醇,12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
11.将吸附柱CG放回废液收集管中,12,000 rpm离心2分钟。
注:此步骤非常重要,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
12.将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100 μl经65℃水浴预热的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,12,000 rpm g离心2分钟。
注;1. 洗脱缓冲液体积最好不少于50 μl,体积过小影响回收效率。
2. 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。
13. DNA产物-20℃保存。
● DNA浓度及纯度检测:基因组DNA*(代"片")段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA*(代"片")段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。
RFT057型BCA蛋白定量试剂盒大量库存促销关键词:百奥莱博,BCA蛋白定量试剂盒,RFT057
·1×Western半干转转膜液
编号:RFT079
英文名称:Western Semi-dry Transfer Buffer
规格:1L(粉末)
1×Western半干转法膜液可以用于Western时半干法电转膜。
本Western半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液,没有使用剧毒的甲醇,也没有使用其它的有毒试剂。
配制Western 半干法转膜液的方法非常便捷,不需要调节pH值。
本Western转膜液共1瓶,可以配制1升Western半干转膜液。
保存条件: 室温保存,两年有效。
注意事项: 配制好的半干法转膜液可室温或4℃保存。配制好的半干法转膜液长期存放后,如果颜色变成浅棕色或黄褐色,应丢弃。
需使用分析纯级别的乙醇或纯度更高的乙醇。
使用说明:1. 取一瓶可以配制1升Western转膜液的粉剂,倒入到一洁净的烧杯中,加入蒸馏水到约700毫升,溶解。
2. 再加入200毫升无水乙醇或210毫升95%乙醇,混匀。
3. 然后在量筒中用蒸馏水定容到1升。混匀后即可使用,无需调节pH值。没有用完的转膜液可室温或4℃保存,通常两周内使用没有任何问题。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时,应该丢弃。
RFT057型BCA蛋白定量试剂盒大量库存促销关键词:百奥莱博,BCA蛋白定量试剂盒,RFT057
·D2000 II DNA ladder(100-2000bp)
编号:RFT014
规格:100次
● 产品简介:
本产品是由7条带状双链DNA条带组成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。产品中已含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。6条带的大小分别为100,250,500,750,1000,1500,2000bp。其中750bp条带为100ng/5μl,显示加亮带,其余条带浓度50ng/5μl。
● 使用方法:1.取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl,如果加样孔宽于5mm,可以适当增加上样量)就行电泳。
2.建议电泳条件:凝胶浓度为1.5-2.0%,凝胶长度5-7cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间15-20分钟。
3.通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注:如果使用Goldview等染料就行染色,由于灵敏度比EB低,请酌情增加Marker的上样量。
● 注意事项:1.琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2.请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果
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