北京琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒品牌在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒品牌
规格：100次|200次
编号：RFT030
产地：国产|进口
● 试剂盒内容：试剂盒组成 100次 200次
溶胶液PN 100 ml 200 ml
3 M NaAc pH5.2 500μl 500μl
漂洗液PW 25 ml 2×25 ml
洗脱缓冲液EB 15 ml 15 ml
吸附柱CA1 100个 2×100个
收集管（2 ml） 100个 2×100个
说明书 1份 1份
● 储存条件：本试剂盒在室温（15–25℃）干燥条件下，可保存12个月；更长时间的保存可置于2–8℃。（注意：当低温贮存时，使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10-20分钟，以平衡溶液温度。）
● 产品简介：
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统，从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA*(代"片")段，同时去除蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100 bp–40 kb大小的片段，回收率大于80%（<100 bp 和>10kb 的DNA*(代"片")段回收率为30－50 %）。
每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为20 μg。
使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
● 产品特点：1 溶胶液PN为亮黄色，便于观察胶是否彻底融化和溶胶体系的pH是否合适。
2 操作快捷，单个样品操作少于15分钟。
注意事项：请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。
1 电泳时最好换用新鲜的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果；如有可能，尽量使用TAE系统，因为有研究指出使用TBE系统后，回收产物中的痕量硼酸会影响后续的酶切反应。
2 切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤；请尽量去除不含目的片段的琼脂糖凝胶，这将会对融胶很有帮助。
3 第一次使用前请按照标签说明在漂洗液PW中加入无水乙醇，并做好标记，用完后紧拧瓶盖。
● 操作步骤：如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1 将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分）放入干净的离心管中，称取重量。
2 向胶块中加入3倍体积溶胶液PN （如果凝胶重为100mg，其体积可视为100 氀，则加入300 氀溶胶液），55℃水浴放置10分钟，其间不断温和地上下翻转离心管，以确保胶块充分溶解。
注意：1 如果此时溶胶液变为粉红色，请加入少量3M NaAc pH5.2（一般说来，10μl足矣），使溶胶液变为黄色再上柱离心。
2 对于高浓度的凝胶（>2％），按照100mg凝胶加入100μl灭菌水和600μl溶胶液PN的比例加入溶胶液PN。
3 胶块完全溶解后最好将胶溶液温度降至室温再上柱，因为吸附柱在较高温度时结合DNA的能力较弱。
3 当目的片段<500bp时，如想提高回收效率，向溶胶体系种加入1/3溶胶液PN体积的异丙醇（如使用300μl溶胶液，则加入100μl异丙醇），混匀，55℃温浴1分钟后再进行步骤4。当目的片段>500bp时，省略此步骤，直接进行步骤4。
4 将上一步所得溶液加入到吸附柱CA1中（吸附柱放入收集管中），室温放置2分钟，13,000 rpm离心60秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放入收集管中。
注意：1 吸附柱CA1的有效容积为700μl，如溶胶体系体积大于700μl，分次上柱，保证全部溶液都加到吸附柱中。
2 <100bp和>10kb的片段请在室温放置10分钟，这将会提高回收效率。
5 向吸附柱中加入700μl漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），13,000 rpm离心60秒，倒掉废液，将吸附柱重新放入收集管中。
6 向吸附柱中加入500μl漂洗液PW，13,000 rpm离心30-60秒，倒掉废液。
7 将离心吸附柱CA1放回收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液。
注意：此步必不可少！如果漂洗液有残留会影响回收效率和DNA质量，进而影响下游实验；离心后将吸附柱盖子打开，室温放置2分钟，这样将有助于彻底挥发残余乙醇。
8 将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB（一般不要少于30μl），室温放置2分钟。13,000 rpm离心1分钟收集DNA溶液。
注意：1可将洗脱缓冲液EB预热到70℃后再加到吸附膜上，这样可以提高洗脱效率。
2 CA1柱的洗脱体积不应少于30 μl，体积过小将会降低回收效率。
3洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率
9 DNA产物-20℃保存。

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·Western封闭液I（BSA）
编号：RFT086
规格：100ml
● 产品简介：
Western Blot 实验中，为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分（如抗体 IgG 等）发生非特异性吸附，导致实验结果不清晰，通常在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。
本产品以BSA为基础，采用独特配方，可快速高效地封闭膜上多余的结合部位，减少非特异结合情况的产生，降低背景，适用于各种转印膜的封闭，操作方便快捷。
另外，本产品特别添加了蛋白稳定剂，可保证每次实验封闭效果稳定可靠。
● 贮存： 2-8℃贮存，有效期半年。
● 注意事项：1 由于BSA中含有微量牛IgG，其结构与羊（goat and sheep）IgG极其类似。因此来源于羊的一抗或二抗能与牛IgG交叉反应，产生高背景。因此该封闭液不推荐用于羊来源的一抗或抗羊的二抗。
2 该封闭液适用于streptavidin/biotin系统以及AP底物检测系统。
● 使用说明：1. 本产品无需稀释，开盖即用。
2. 目的蛋白转移完毕后，将印迹膜放入容器中，加入适量Western封闭液I（以完全覆盖印迹膜为宜） 。
3. 室温孵育30分钟至2小时，必要时可4℃孵育过夜。
4. 封闭结束后弃去封闭液，进行Western Blot后续操作。


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