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- ZY-PCR-737
- 2025年07月11日
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- 技术资料
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-20℃
- 保质期：
4℃四个周；如长期保存，2X Direct PCR Mix 须-20℃；勿反复冻融超过3次。
- 库存：
20
- 供应商：
上海泽叶生物科技有限公司
- 规格：
50T/100T
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。
2）猪流感病毒通用型（SIV-U） 核酸检测试剂盒（RT-PCR法）普通PCR反应流程
3）反应原理
4）PCR循环
5）与荧光定量PCR技术相比较主要缺点。
猪流感病毒通用型（SIV-U） 核酸检测试剂盒（RT-PCR法）荧光PCR简述
定义：在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的变化，通过仪器软件实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过Ct值和标准曲线实现对起始模板的定量分析。
荧光PCR检测分为两种方法：荧光探针法和荧光染料法。
荧光探针法检测原理：
荧光PCR如何实现实时监控的呢？
Ø PCR反应体系中加入荧光染料
Ø 所有的定量PCR仪器都有三个共同的组成部分（检测器、激发光源、热循环模块）
Ø 在扩增过程中，荧光信号随着PCR产物的增加而增强
Ø 每个循环结束后，定量PCR仪器通过光学系统记录荧光信号的增加
Ø PCR软件计算出数据，用于实验结果的分析
ARMS检测方法；1个SNP位点设计双管反应，含目的基因检测及内参检测双通道。
猪流感病毒通用型（SIV-U） 核酸检测试剂盒（RT-PCR法）技术特点：
Ø 准确可靠，临床双盲对照试验＞1000例，结果与金标准测序法比对，结果一致性大于99%。
Ø 高灵敏：可检测低至10ng的人基因组DNA。
Ø 快速：整个检测流程只需3小时。
Ø 简便：试剂盒提供预混好的试剂，使体系配置操作简便。
Ø 防污染
Ø 高特异性：双重特异性组成，保证检测结果的特异性和准确性引物与DNA互补链结合必需完全配对，才能延伸。探针特异性与所检测基因的PCR产物配对，在延伸中产生荧光。
蜡样芽孢杆菌sleL基因(110bp)常规PCR检测试剂盒50T
蓝舌病毒RT-PCR检测试剂盒50T
类鼻疽伯克霍尔德菌PCR检测试剂盒50T
鲤春病毒PCR检测试剂盒50T
立克次体PCR检测试剂盒50T
利什曼原虫PCR检测试剂盒50T
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文献和实验CTAB 法 ①取0. 2g 各中药材样品分别用液氮( Ⅰ) 、玻璃砂( Ⅱ) 、氧化铝( Ⅲ) 研磨。②加入56 ℃ 10 倍预热的缓冲液C 于56 ℃温育30 min , 离心, 取上清液加入等体积氯仿- 异戊醇(24∶1) 抽提(室温, 不能低于15 ℃, 否则CTAB 会沉淀) , 10 000g 离心15 min。③取上清液加入1/ 10 倍体积缓冲液D , 于室温下放置15 min , 再用等体积氯仿- 异戊醇(24∶1) 抽提1 次。④上清液加入缓冲液C 于室温下放置6h
这是最早用于性病诊断的重组DNA技术。基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定条件下（适宜的温度及离子强度等）可按碱基互补原则形成双链，此杂交过程是高度特异的。杂交的双方是待测核酸及探针。待测核酸序列为性病病原体基因组或质粒DNA。探针以放射核素或非放射性核素标记，以利于杂交信号的检测。所谓杂交（hydridization）指两个以上的分子因具有相近的化学结构和性质而在适宜的条件下形成杂交体（hybrid），杂交体中的分子不是来自一个二聚体分子。同一个二聚体中的两个分子在变性解离后重组
核酸分离法 Schmidt Thannhauser procedure
这是通过对动物组织核酸的磷酸部分的测定以定量核酸的一种方法。整个分离的操作过程是简单的，而且可将 DNA和 RNA分别进行定量。首先用适当的方法将细胞破坏。使与细胞内的微细构造结合的核酸变成易于提取的状态。然后用酸沉淀法将低分子磷酸化合物除掉，进一步用乙醇—乙醚混合液处理，以除去磷脂质，随之用稀碱处理，仅使 RNA分解成为酸可溶性核苷酸残渣，再用热酸处理，将 DNA分解成为酸可溶性核苷酸。最后测定各部分的磷酸，来求算 DNA和 RNA的量。
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