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- 信帆生物
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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海信帆生物科技有限公司
- 检测方法：
ELISA
- 应用：
科研实验
- 适应物种：
人，大鼠，小鼠
- 样本：
血清，血浆及相关液体
- 规格：
96T
一个好的elisa试剂盒，不是靠广告，而是靠过硬的技术，稳定的质量，良好的口碑，完善的售后。信帆生物所销售的elisa试剂盒，几百篇文献引用，很多知名高校持续使用。欢迎来电咨询！
小鼠γ干扰素（IFN-γ）ELISA检测试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠γ干扰素（IFN-γ）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠γ干扰素（IFN-γ）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
注：标准品浓度依次为：800、400、200、100、50、0 pg/mL.
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
上海信帆生物在科研、中引进了一系列设备和仪器，为公司的迅速应用提供了便利条件，使达到优质高效，保证了产品的高质量。同时，公司严格遵守GMP管理的要求，从原料采购、、销售到售后服务，所有的活动均严格按照质检规程和岗位标准操作规程进行，并保留完整的记录。严格、规范的管理保证了公司产品质量稳定。
Elisa试剂盒操作注意事项：
1、实验室的环境要干净，防止空气中的一些细菌或粉尘对实验造成干扰。
2、一般的酶联免疫试剂盒中的酶标抗体是以辣根过氧化物酶（hrp）进行标记的。因此要求样本不能含（nan3），因为nan3是hrp的抑制剂。
3、如果样本是血清，应该充分离心，不得有颗粒。
4、试剂盒应在保质期内使用。不同批次的试剂盒中的溶液不得混用。
5、在进行酶联免疫实验之前，应该将试剂盒放置室温平衡30min以上。
6、稀释溶液时，应按照说明书的要求进行精确稀释。尽量选用去离子水或双蒸水进行稀释。
7、要正确使用移液器，吸取液体要精准，枪头上不得留有气泡。吸取不同的液体时，要注意更换枪头。
8、加样时要悬臂加样，避免枪头和孔内液体接触。
9、建议所有的样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。孵育时需将微孔用封板膜或保鲜膜封好，防止水分的蒸发。且封板膜不得重复使用。
10、底物显色剂为tmb，应避免与皮肤接触。终止液为2m浓硫酸，具有腐蚀性，应避免与皮肤接触。
ELISA实验中老师问题集锦：
☆★问:你好，我想请问一下你们销售的ELISA试剂盒用的酶标仪有没有什么特别限制，波长是多少？
☆★答:老师，你好！一般普通的酶标仪都可以的。用试剂盒的时候，酶标仪在 450nm 波长下测定即可。
☆★问:你好，我想问一下你们这个ELISA试剂盒的组成成分都有哪些，我拿了之后是直接检测吗，需要自己准备什么试剂吗？
☆★答:老师，你好。我们的试剂盒里面包括了酶标板，酶标试剂，标准品，显色液等所有试剂，老师不需要额外购买其他什么试剂盒，有酶标仪即可检测。
☆★问:你好，我想咨询一下，我的样本含有NaN3，你们说对结果会有影响，标本为什么不能含有NaN3？
☆★答:老师，你好，如果样本含有NaN3的话，是会有影响的，建议重新收集样本。因为NaN3抑制辣根过氧化物酶的活性。
☆★问:是否提供代测服务？
☆★答:购买我司ELISA试剂盒，可以提供免费代测服务。上海和南京地区的客户可以提供免费上门取样的服务，其他地方的老师可以把样本用EP管装好，编好号。放到泡沫箱子中，用干冰和冰袋寄送。我们是收到样本后7个工作日出实验报告。实验报告包括说明书，实验室用的仪器型号，数据，标曲等。
☆★问:你好，我想咨询一下你们的ELISA试剂盒在加样的时候有什么注意事项吗？
☆★答:老师，你好。我们加样的时候有几点是需要注意的，一是加样将样品加于酶标板孔底部，二是尽量不触及孔壁，然后轻轻晃动混匀。
☆★问:你好，我想知道你们的ELISA试剂盒操作的时候里面有一瓶浓缩液，这个浓缩液应该怎么稀释呢？
☆★答:老师，你好。我们96T的试剂盒里面是有配30倍浓缩洗涤液。我们在操作的时候用蒸馏水30倍稀释后使用。
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使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠γ干扰素（IFN-γ）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠γ干扰素（IFN-γ）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪（450nm）
- 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
- 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
- 预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
| 名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
| 标准品 | 0.3mL | 0.3mL | 无 |
| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
- 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
- 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
- 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
- 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
- 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；
- 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
- 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
- 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
- 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
- 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
- 灵敏度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL。
- 检测范围：25 pg/mL - 800 pg/mL
- 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
- 重复性：板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。
- 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
- 有效期：6个月
- 试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
- 严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
Elisa试剂盒操作注意事项：
1、实验室的环境要干净，防止空气中的一些细菌或粉尘对实验造成干扰。
2、一般的酶联免疫试剂盒中的酶标抗体是以辣根过氧化物酶（hrp）进行标记的。因此要求样本不能含（nan3），因为nan3是hrp的抑制剂。
3、如果样本是血清，应该充分离心，不得有颗粒。
4、试剂盒应在保质期内使用。不同批次的试剂盒中的溶液不得混用。
5、在进行酶联免疫实验之前，应该将试剂盒放置室温平衡30min以上。
6、稀释溶液时，应按照说明书的要求进行精确稀释。尽量选用去离子水或双蒸水进行稀释。
7、要正确使用移液器，吸取液体要精准，枪头上不得留有气泡。吸取不同的液体时，要注意更换枪头。
8、加样时要悬臂加样，避免枪头和孔内液体接触。
9、建议所有的样本和空白对照都做双份检测，取平均值，以减小实验误差。孵育时需将微孔用封板膜或保鲜膜封好，防止水分的蒸发。且封板膜不得重复使用。
10、底物显色剂为tmb，应避免与皮肤接触。终止液为2m浓硫酸，具有腐蚀性，应避免与皮肤接触。
ELISA实验中老师问题集锦：
☆★问:你好，我想请问一下你们销售的ELISA试剂盒用的酶标仪有没有什么特别限制，波长是多少？
☆★答:老师，你好！一般普通的酶标仪都可以的。用试剂盒的时候，酶标仪在 450nm 波长下测定即可。
☆★问:你好，我想问一下你们这个ELISA试剂盒的组成成分都有哪些，我拿了之后是直接检测吗，需要自己准备什么试剂吗？
☆★答:老师，你好。我们的试剂盒里面包括了酶标板，酶标试剂，标准品，显色液等所有试剂，老师不需要额外购买其他什么试剂盒，有酶标仪即可检测。
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☆★答:老师，你好，如果样本含有NaN3的话，是会有影响的，建议重新收集样本。因为NaN3抑制辣根过氧化物酶的活性。
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☆★答:购买我司ELISA试剂盒，可以提供免费代测服务。上海和南京地区的客户可以提供免费上门取样的服务，其他地方的老师可以把样本用EP管装好，编好号。放到泡沫箱子中，用干冰和冰袋寄送。我们是收到样本后7个工作日出实验报告。实验报告包括说明书，实验室用的仪器型号，数据，标曲等。
☆★问:你好，我想咨询一下你们的ELISA试剂盒在加样的时候有什么注意事项吗？
☆★答:老师，你好。我们加样的时候有几点是需要注意的，一是加样将样品加于酶标板孔底部，二是尽量不触及孔壁，然后轻轻晃动混匀。
☆★问:你好，我想知道你们的ELISA试剂盒操作的时候里面有一瓶浓缩液，这个浓缩液应该怎么稀释呢？
☆★答:老师，你好。我们96T的试剂盒里面是有配30倍浓缩洗涤液。我们在操作的时候用蒸馏水30倍稀释后使用。
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