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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Enhanced ECL chemiluminescence detection kit
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
100ml|200ml
增强型ECL化学发光检测试剂盒
规格:100ml|200ml英文名:Enhanced ECL chemiluminescence detection kit
储存条件:2-8℃避光保存。
有效期:一年
产品简介:
免疫印迹最重要也是最后一步就是酶与底物反应进行检测,本试剂盒以化学荧光发光方法检测蛋白质或核酸类生物大分子。其原理是,蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上,以一抗及辣根过氧化物酶HRP 标记的二抗结合膜上的目的蛋白,或以HRP 标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用本产品配制的ECL 工作液,在可见光下室温孵育膜数分钟,将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于X 光片曝光暗盒。然后转入暗室将X 光胶片压在膜上曝光数秒到数分钟至数小时。显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在X 光胶片上。也可不进行X 光胶片曝光直接对印迹膜进行荧光CCD 扫描。
产品特点:1、高灵敏度 2、低背景
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文献和实验Ecl 显色原理:鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物,也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中,含有H2O2和鲁米诺,在HRP(辣根过氧化物酶)的作用下,发出荧光来。 试验步骤: 1)将两种显色底物1:1等体积混合(一般各1ml/membrane)。 2)将混合物覆盖在膜表面,1-2分钟,摇晃使均匀。 3)用保鲜膜把膜包起来,放入夹板中。 4)在暗室中将X光片,覆盖在膜的上面,夹好夹子,曝光1min。 5)显影、定影。 6)根据结果调整曝光时间和曝光区域,得到
蛋白质免疫印迹(Western Blot )-底物化学发光 ECL 法
蛋白质免疫印迹(Western Blot )可以:(1)从蛋白质混合物中检出目标蛋白质;(2)定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况;(3)用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。与 Southern 或 Northern 杂交
方法也不同,常用的检测系统有化学发光检测(ECL)和化学显色 DAB 检测系统。 化学发光检测(ECL): 利用 HRP 催化化学发光物质,生成一种不稳定的中间物质,其衰变时在暗室内形成明显的肉眼可见的化学发光带,利用 X 胶片感光 原理,将结果记录下来。 ECL 显色试剂配制:化学发光底物 A 和 B 按照 1:1 比例等体积混匀。 将混合好的显色底物覆盖印迹膜 1-5 min,黑暗条件下观察荧光效果。 在暗室可用放射自显影胶片或化学发光成像系统记录结果 。 如采用放射自显影胶片,曝光几秒
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