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大量
- 供应商:
康朗生物
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5KU|1KU|500U
小牛肠碱性磷酸酶(CIP)
规格:5KU|1KU|500U特性:
克隆载体去磷酸化,防止载体自连
T4 多聚核苷酸激酶标记 DNA 末端前的去磷酸化
测序或 SNP 分析前 PCR 反应中 dNTP的处理
DNA 和 RNA 的去磷酸化
概述:
小牛肠碱性磷酸酶(CIP)催化 DNA 和 RNA 5´ 和 3´ 磷酸单脂的去磷酸化反应。另外,CIP 水解核糖和脱氧核糖核苷三磷酸(NTP 和 dNTP)。CIP 在分子生物学研究中应用广泛,如去除 DNA 和 RNA 末端的磷酸基团,用于后续的克隆和探针末端标记。在克隆中,对线性载体去磷酸化,防止自连。该酶可以作用于 5´ 突出端、凹陷端和平末端。CIP 也可以用来降解 PCR 反应中的游离 dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。
来源:
小牛肠粘膜。
反应条件:
1X 反应缓冲液
[50 mM KAc, 20 mM Tris-Ac, 10 mM Mg(Ac)2, 100 μg/ml BSA (pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。
质保声明:
小牛肠碱性磷酸酶(CIP)经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1 单位指在 1 ml 反应体系中,37℃ 条件下,1 分钟催化 1 μmol 的对硝基苯磷酸盐(PNPP)水解成对硝基苯酚所需的酶量。
浓度:
10,000 units/ml。
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文献和实验克隆成功与否,除与连接方式以及载体选择有关外,载体的处理也是一个重要环节。为了提高连接效率,处理载体时应注意以下几点:(1)应加入常用量5~10倍的内切酶水解载体,以保证载体被完全酶切;(2)如用双酶切割载体,则必须电泳回收载体片段,除去双酶切所产生的小DNA片段;(3)如粘端连接,单酶切处理过的载体必须用碱性磷酸酶 (如牛小肠碱性磷酸酶,CIP)处理,防止载体自身环化。CIP可以水解掉DNA5末端的磷酸。对于3末端突出的DNA(如PstI水解,需用10倍于5末端突出DNA(如EcoRI
克隆成功与否,除与连接方式以及载体选择有关外,载体的处理也是一个重要环节。为了提高连接效率,处理载体时应注意以下几点:(1)应加入常用量5~10倍的内切酶水解载体,以保证载体被完全酶切;(2)如用双酶切割载体,则必须电泳回收载体片段,除去双酶切所产生的小DNA片段;�(3)如粘端连接,单酶切处理过的载体必须用碱性磷酸酶(如牛小肠碱性磷酸酶,CIP)处理,防止载体自身环化。CIP可以水解掉DNA5末端的磷酸。对于3末端突出的DNA(如〖WT5BX〗Pst〖WT5BZ〗I水解,需用10倍于5末端
克隆成功与否,除与连接方式以及载体选择有关外, 载体的处理也是一个重要环节。为了提高连接效率,处理载体时应注意以下几点:� (1) 应加入常用量5~10倍的内切酶水解载体,以保证载体被完全酶切;� (2) 如用双酶切割载体,则必须电泳回收载体片段,除去双酶切所产生的小DNA片段;� (3)如粘端连接,单酶切处理过的载体必须用 碱性磷酸酶 (如牛小肠碱性磷酸酶,CIP)处理
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