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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
一年
- 英文名:
MS-Compatible Silver Stain for Protein
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
10次
质谱兼容型蛋白银染试剂盒
规格:10次英文名:MS-Compatible Silver Stain for Protein
产品简介:
银染是目前检测PAGE电泳分离后的蛋白质的最灵敏的方法,MS(质谱)是确定未知蛋白最常用和最快捷的方法,但将银染得到的蛋白直接用于MS分析有很多问题,其中最主要问题是常规银染所使用的试剂(包括强氧化剂和醛类)容易使蛋白质发生化学修饰,这样MS分析得到的氨基酸信息跟蛋白质实际的氨基酸信息并不相同。为了使银染得到的蛋白质可以用于MS分析,为此本公司开发MS兼容型银染试剂盒,其特点如下:
1.跟MS兼容,原理是避免使用能化学修饰蛋白质的试剂,所得蛋白质没有发生化学修饰,故可直接用于后续的MS(包括MALDI-TOF-MS和ESI-MS)分析。
2.银染的灵敏度比考马斯亮蓝染色高100倍左右,可达0.2-0.6 ng蛋白质/条带。
3.可用于各种PAGE胶,包括变性PAGE胶(如SDS-PAGE,尿素-PAGE),非变性PAGE胶,IEF胶(等电电泳胶),2D胶等。
4.四种溶液都是现用现配,实验结果的可重复性好。
使用及效果:
将PAGE胶固定后放入溶液A中固定30min后移入水中漂洗3次,每次5min。
然后放入B溶液中染色20分钟,用水快速漂洗2次,再在溶液C中显色至条带清晰可辨,取出固定后即可照相。银染之后可进行后续MS分析。
运输及保存:
常温,有效期一年。
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文献和实验真香!用 qPCR 做外泌体研究,南京医科大学拿下 41 分 SCI
。 2)RNA 提取 外泌体 RNA 可以用专用的外泌体 RNA 提取试剂盒提取,也可以用 Trizol 法提取,建议 Trizol 与外泌体的体积比不小于 4:1(也可以用 Trizol 直接裂解外泌体沉淀)。 具体操作:取 200 μl 外泌体于 1.5 ml EP 管中,加入 800 μl Trizol 试剂,充分混合,裂解 10 min,12000 rpm 离心 10 min 取上清。 3)反转录 采用 Umibio 4× 预混型快速逆转录试剂盒:适用于长片段 RNA(如 mRNA、LncRNA
基于质谱的蛋白质鉴定,第6节:MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
物干燥,连续洗涤使用预制型的薄层基质。该方法为精确和灵敏的MALDI检测创造了最佳条件。然而,这种样品制备方法制备的样品不能承受激光辐射,会被迅速漂洗。因此,该方法不适用于PSD光谱的蛋白质谱鉴定,因为PSD光谱法通常每个片段质量范围需要多达100甚至以上次数反复的激光辐射。 如果在分析之前,使用小型吸附柱对较大体积的肽混合物进行浓缩,抑或通过向肽混合物中添加少量反相色谱珠的方式进行批量吸附。而进行批量吸附,只需要将磁珠吸附到的肽混合物进行洗涤,即可获得肽混合物,然后转移至上样处并干燥即可。这种
用PlusOne蛋白银染试剂盒染Ettan DALT凝胶的优化方法... 98 参考文献... 99 其它读物和参考材料... 104 推荐的其它耗材... 104 订购信息... 105
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