TNM-FH昆虫细胞培养基

样品体积大，有什么方便的上样方法？

在哺乳动物和昆虫细胞表达系统中，目的蛋白经常分泌到细胞培养基。因此，在进行纯化前，我们的目的蛋白已存在于大体积培养液中。然而有时，用来纯化目的蛋白柱子体积却只有 1 ml。时间金贵，手动一次一次的将样品加入柱子中就太麻烦了，简直是要加到头秃有木有！ 不知道大家为了简化操作，节省时间，都使用了怎样的方法来上样呢？ 今天为在这里为大家分享一个锦囊工具：Wet Fred。这个小体积的工具非常灵活，可以根据我们的实验需要，使用在实验台、冰箱和冷室中。 优点 Wet Fred 工作

对比 Strep-tag 与 His-tag 系统异同点？

动物和昆虫细胞表达系统，尤其是分泌蛋白的纯化中，His-tag系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基pH通常为酸性，会干扰His-标签蛋白与IMAC纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基，则通常含有氨基酸会竞争His-标签的结合位点，如组氨酸，谷氨酰胺或精氨酸。 Strep-tag®系统对各宿主表达系统的适用情况较为理想。根据其纯化原理，酸性pH和有力的氨基酸不会影响Strep-标签蛋白与纯化树脂的结合（前文也曾提到，此系统的耐受pH范围为4-10）。而哺乳动物细胞培养基中存在的生物素需要注意

聊一聊蛋白纯化都在讨论的质与量

十分重要，因其不仅影响蛋白的表达，而且也影响随后的纯化过程。除耐受缓冲液条件有限外，当选择宿主表达系统时，His-tag 也有一些局限。 His-tag 大肠杆菌表达系统中较为有利，但实际情况下对于酵母，哺乳动物和昆虫细胞表达系统，尤其是分泌蛋白的纯化中，His-tag 系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基 pH 通常为酸性，会干扰 His-标签蛋白与 IMAC 纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基，则通常含有氨基酸会竞争 His-标签的结合位点，如组氨酸，谷氨酰胺或精氨酸。 Strep