- ￥800 - 1300
- BestBio贝博
- BestBio贝博
- BB-41272
- 2025年07月12日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2-8℃
- 库存：
大量
- 供应商：
BestBio贝博
- 规格：
500T/100T
贝博® BBcellProbe® 正常细胞/膜损伤细胞染色试剂盒是采用Calcein-AM/7-AAD双染细胞的方法染色活细胞和膜损伤细胞（死细胞）。 活细胞的特征是无处不在的细胞内酯酶活性，Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，Calcein-AM由于在Calcein的基础上加强了疏水性，因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后，酯酶会将其水解为Calcein，聚阴离子染料Calcein很好地保留在活细胞内，几乎无荧光的Calcein-AM转变为绿色荧光的Calcein，在活细胞中发出均匀的强绿色荧光。 与其它同类试剂（如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate）相比，Calcein-AM是最适合作为荧光探针去染活细胞的，因为它的细胞毒性很低，而且不会抑制任何的细胞功能，如增殖和淋巴球的趋化性。Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。Calcein -AM仅对活细胞染色。 7-AAD是一种非渗透性荧光染料，作为核染色染料的7-AAD不能穿过正常活细胞的细胞膜，但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA上，形成具有高荧光性的加成物，从而产生红色荧光(激发：488，545nm，发射：647 nm)，因此7-AAD仅对膜损伤的死细胞染色。可以用来检测膜损伤的无活性的细胞。 由于Calcein和7-AAD-DNA都可被490 nm激发，因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和膜损伤细胞。用545 nm激发，仅可观察到膜损伤细胞。 本染色方法适用于荧光显微镜、荧光酶标仪等微孔板荧光扫描设备、流式细胞仪或者其它的荧光设备。 本染色方法适用于大多数真核细胞，包括贴壁细胞和某些组织样本，单不包括细菌和酵母样本。 需要注意的是，Calcein-AM/7AAD双染有效染色的前提是相应的细胞模型的活力变化是酯酶活性变化和质膜完整性变化这些物理和生化特性，不影响这些细胞特性的细胞毒性事件可能不能使用此方法进行准确评估。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验1. 染色工作液的配制：
根据样品数按下列比例配制染色工作液。
用稀释液将染料10倍稀释，再用相应的无血清培养基或其他缓冲液（如HBSS）进行50-100倍稀释，配制成染色工作液。。
2. 收集样本细胞，细胞数量在1X106个以内。
3. 用PBS洗涤细胞两次。
4. 用200 μl染色工作液将细胞重悬。
5. 4℃避光孵育15-30分钟。
6. 用PBS洗涤细胞。
7. 用适量PBS重悬细胞。
8. 用荧光显微镜或流式细胞仪检测结果。染料-DNA复合物的最大激发490±10nm，最大发射波长分别为515nm和647nm。
结果分析 ：
荧光显微镜下，使用490±10nm波长激发，活细胞为黄绿色，膜损伤细胞为红色。
用545 nm波长激发，能够看到红色的膜损伤细胞/死细胞。
1.所有细胞都染上红色？
7AAD浓度过高会导致活细胞也被染色，需要优化7AAD的使用浓度，稀释至仅对膜损伤细胞核染色，而不会对细胞质染色的最佳工作浓度。
2.细胞被同时染上绿色和红色？
样本中有大量晚期凋亡细胞时，细胞胞浆会有Calcein着色并呈碎片状，而且7AAD也为阳性。
）它可被活细胞持留而发出黄绿色荧光；若细胞有损伤则会从细胞中流失，观察不到荧光。另一类是不能透过活细胞膜，但能对固定的细胞及膜有破损的细胞的核进行染色，例如碘化丙啶（PI,Propidium iodide）和溴化乙锭（EB,Ethidium bromide ）就是常用的第二类荧光探针。 用FCM来测定活细胞生物功能发挥方面和性能的指标很多。例如可用来测细胞膜电位、细胞内pH值和细胞内钙等，这些都和细胞的激活密切相关。FCM也可用来测膜结构的流动性或微粘度等。有报告可以用FCM代替
体现在： (1)死活细胞细胞膜 通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择性膜，对细胞起保护和屏障作用，只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后，细胞膜受损，通透性增加。 (2)死活细胞在代谢上的差异：由于活细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，而死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们的无还原能力或还原能力极弱。 常见的细胞染料有：中性红(细胞器 的专有染料)、台盼蓝、甲基蓝、美蓝、荧光素双醋酸酯(FDA)等。 ① 中性红染色：常用染料
体现在： (1)死活细胞细胞膜 通透性的差异：活细胞的细胞膜是一种选择性膜，对细胞起保护和屏障作用，只允许物质选择性的通过;而细胞死亡之后，细胞膜受损，通透性增加。 (2)死活细胞在代谢上的差异：由于活细胞中新陈代谢的作用，使细胞内具有较强的还原能力，而死细胞或代谢缓慢的老细胞，则因它们的无还原能力或还原能力极弱。 常见的细胞染料有：中性红(细胞器 的专有染料)、台盼蓝、甲基蓝、美蓝、荧光素双醋酸酯(FDA)等。 ① 中性红染色：常用染料
