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- KALANG
- 中国大陆
- KL152
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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冷藏
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
20次/60次
pSURE-T Simple载体
规格：20次/60次编号：KL152
产品介绍：
pSURE-T Simple载体是一种高效克隆PCR产物(TA Cloning)的专用载体。许多高温DNA聚合酶，如Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶等扩增的PCR产物在3"-末端后都带有一个突出的碱基A，这样的PCR产物可以用3"-末端后带有一个突出碱基T的载体方便地进行克隆。pSURE-T Simple载体是为简化PCR产物的克隆而设计的，是一种新颖的pUC系列T载体，它消除了pUC载体上的多克隆酶切位点，再在多克隆酶切位点引入了Xcm I酶切位点，然后通过Xcm I酶切后使其多克隆位点两侧的3"末端直接产生未配对的T碱基，因此有更高的重组效率。这种载体尽管消除了lac Z基因上的多克隆酶切位点，但不影响β-半乳糖甘酶的正常表达，因此，PCR产物克隆后仍然可以利用α-互补进行蓝白斑菌落的筛选，挑选阳性克隆。这种载体由于消除了多克隆酶切位点，克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制性内切酶切下，需要在PCR扩增的引物上引入合适的酶切位点。可以用M13通用引物和T7启动子引物对PCR产物进行测序。该载体含有T7 RNA聚合酶的启动子，可以对插入片段进行体外转录。
产品储存：
-20°C 保存，避免反复冻融。
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文献和实验在丁香园见过很多大佬分享载体构建经验，所以我这里写的T载体构建只能算是入门级，给新手提供一点思路，有什么不足之处还希望大家多多指正。 我克隆的这个片段大小是1.8kb，用的是TaKaRa的LA-Taq酶做的PCR。 反应体系：5*buffer 5 ul MgCl2 5 ul dNTPs 8 ul Primer 1 1 ul Primer 2 1 ul LA-Taq 0.5 ul cDNA 1 ul (1ug左右基因组DNA） ddH2O up to 50 ul
How to Make Simple Solutions and Dilutions
1. Simple Dilution (Dilution Factor Method based on ratios) A simple dilution is one in which a unit volume of a liquid material of interest is combined with an appropriate volume of a solvent liquid to achieve the desired concentration
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