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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
EcoR I-Not I-BamH I Adaptors
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
1nmol
EcoR I-Not I-BamH I接头
英文名:EcoR I-Not I-BamH I Adaptors规格:1nmol
产品简介:
本产品为一条链磷酸化,另一条链没有磷酸化的DNA接头序列,两条链结合后形成双链结构。5′端具有EcoR I 位点,链中还具有Not I 和BamH I 的酶切位点。本制品已经是Annealing后产品,可直接用灭菌水或TE Buffer溶解后使用。
运输及保存:
低温运输、-20℃保存、有效期一年。
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文献和实验腺嘌呤N6位置上引入甲基,这样可使一些识别顺序中含有5'GATC3'的限制性内切酶不能切割来自大肠杆菌的DNA如Bcl I(TGATCA),但BamH I(GGATAA)则不会因为N6A的甲基化而失去活性,因为这两种酶对底物的特异性不同. dcm甲基化酶 此酶在序列5'CCAGG3'或5'CCTGG3'中的胞嘧啶C5上引入甲基,受其影响的限制性内切酶是EcoR II. (二) 甲基化酶在基因工程中用途 许多II类限制性内切酶,都存在着相对的甲基
,那么经 M.MspⅠ 处理的 DNA (GGAT m5CCGG)对 BamHⅠ 不敏感(即抵抗切割)。 构建 DNA 文库时,用 AluⅠ(AG↓CT) 和 HaeⅢ(GG↓CC) 部分消化基因组 DNA 后,将得到的片段用 M.EcoRⅠ 甲基化酶处理,然后加上合成的 EcoRⅠ 接头,再用 EcoRⅠ 来切割时只有接头上的位点可被切割,从而保护基因组片段。 2.产生新的酶切位点 通过甲基化修饰可产生新的酶切位点。 DpnⅠ 是依赖甲基化的限制
其基本原理是:以PCR(聚合酶链式反应)为基础,结合了RFLP、RAPD的分子标记技术。把DNA进行限制性内切酶酶切,然后选择特定的片段进行PCR扩增(在所有的限制性片段两端加上带有特定序列的“接头”,用与接头互补的但3-端有几个随机选择的核苷酸的引物进行特异PCR扩增,只有那些与3-端严格配对的片段才能得到扩增),再在有高分辨力的测序胶上分开这些扩增产物,用放射性法、荧光法或银染染色法均可检测之。 一、 实验
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