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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
Instant Blue-White Vector T,Type A
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
20次
即用型蓝白T载体A型(T7-SP6,有MCS)
英文名:Instant Blue-White Vector T,Type A编号:KL60603
产品简介:
本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA*(代"片")段,其两个末端的5"都有一个突出的T,可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。
1.由于是通过酶切制备,所以载体两端的带T率为100%,远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
2.克隆的阳性率一般在90%以上,缩短了筛选过程。
3.插入位点两侧有对称的常见酶的酶切位点(如Bst ZI、Eco RI、Not I),便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
4.克隆位点两侧分别有T7和SP6 RNA聚合酶启动子,便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
6.T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α 肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
7.含有丝状噬菌体f1 复制起始子,可以制备单链DNA。
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,有效期两年。
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文献和实验3.0载体、pCDNA3.1 myc his C载体和pEGFP载体) .0的MCS两端有T7和SP6 如果我用T7和SP6作为引物,则 1.P出大小约150bp的片段,则为MCS序列,无插入片段 2,若有插入片段,则应该为目的大小+152bp 如下图所示: 后再改进为T7+目的基因下游引物(目的基因-R),或者目的基因上游引物(目的基因-F)+SP6
Recombinant DNA Engineering, Or Cloning Genes In Plasmids
also usually have promoter segments for phage polymerases (like T7 and SP6 RNA polymerases) such that one can use in them vitro to produce RNA. A plasmid designed for mammalian expression also usually has a transcription termination and polyadenylation signal
热稳定性聚合酶(1,2)产生PCR产物提供一个匹配碱基。如表1总结的,这些聚合酶常常以不依赖模板方式在扩增产物的3’端加上一个脱氧腺苷酸(3,4)。pGEM®-TEasy高拷贝数载体包含有T7和SP6RNA聚合酶启动子,其侧翼和多克隆位点区相接,多克隆位点区位于β半乳糖苷酶的α肽编码区内。α肽插入失活允许在指示培养基用颜色直接筛选重组克隆。另外这两个载体的多克隆位点区的限制性酶切位点适用于采用Promega公司Erase-a-Base®系统(产品目录号#E5750)产生一系列巢式缺失
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