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- KALANG
- 中国大陆
- KL267
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
PLB zero background rapid cloning Kit (excluding MCS)
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
20次
pLB零背景快速克隆试剂盒(不含MCS)
编号：KL267英文名：PLB zero background rapid cloning Kit (excluding MCS)
规格：20次
pLB零背景快速克隆试剂盒（不含MCS）是一种阳性选择克隆系统，可以高效克隆各种PCR产物和任何具有平末端或粘性末端的DNA*(代"片")段。该试剂盒对磷酸化或非磷酸化的DNA*(代"片")段都有效。阳性选择载体和插入片段连接仅需5 min即可获得超过95%的阳性重组克隆。由具有校正活性的聚合酶（如：Pfu Polymerase）扩增的平末端PCR产物可直接连入克隆载体。由无校正活性的聚合酶（如：Taq Polymerase）或聚合酶混合物扩增的PCR产物在连接前需用试剂盒提供的热稳定DNA平端化酶进行末端平端化（7 min）即可。连接产物可直接转化常用的大肠杆菌菌株。
试剂盒提供一个新颖的即用型阳性选择克隆载体pLB-simple Vector。该载体含有致死基因，克隆位点处插入外源片段会引起基因失活，因此只有转化了重组质粒的细菌才能存活形成克隆菌落。而自身环化的pLB-simple Vector表达致死毒性蛋白（无外源片段插入），转化后杀死大肠杆菌细胞。这种阳性筛选策略无需蓝白斑筛选，极大地加速了克隆筛选进程。
产品特点：
高效快速：零背景无需蓝白斑筛选，5 min快速连接
灵敏广泛：适合低浓度片段和长片段连接，适合平/粘末端连接
无多克隆位点：方便客户自行引入酶切位点进行亚克隆
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文献和实验： 1、找到载体全序列 ，查找有没有你想要加的位点（Primer premier5……一堆软件 ，再不济了用word），如果没找到你想加、减、换的位点，恭喜了，革命要成功了； 2、方法上不太推荐点突变或其他以overlap PCR 为基础的技术，推荐小片段 克隆 ，也就是做shRNA 载体的那种方法，人工合成（按引物 合成）你想要的MCS序列的正反链，两端加上载体上两个切点的粘末端序列，人工退火（95度10min，然后每分钟降5度直至Tm值下5度，维持10min，即可），不用电泳检验，直接
美国血液公司生产的MCS+LN9000-220E/ED血液细胞分离机是适应于各类输血站、大中型医院检验科使用的血液分析设备，主要用于采集血小板并对其做细胞分析。由于操作人员工作上的粗心大意，导致仪器出现一系列故障。 1、故障一 离心杯放不进离心机卡槽内。 1.1 检查步骤 (1)试机检查：选择LDP模式，开启电源开关前，将MCS+LDP程序卡装入卡舱，打开电源开关，MCS+首先进行2项诊断自检，自检完成后，屏幕显示检测内容，观察所有像素正常，自检通过。 (2)根据屏幕信息，安装
phoolishkate：脂质体转染后必须用不含抗生素的培养基吗？我的培养基都加了青链霉素，转染后是不是不能用？丁香园网友applezph认为：由于脂质体转染对细胞存在一定毒性，一般说来转染前的一次传代就应用不含抗生素的培养基，转染后的话我觉得也不应该加青链（我都是这么做的）当然如果对自己的操作实在没有把握的话，我认为你可以考虑试试转染后加，但不要太早，4-6小时换液用无抗生素的，可以24后再换用含抗生素培养基丁香园网友qxlbljys认为：1.做细胞转染时，由于转染介质如脂质体可增加膜的通透
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