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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
PGM-T recombinant colony PCR identification Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
50次
pGM-T重组菌落PCR鉴定试剂盒
编号:KL282规格:50次
英文名:PGM-T recombinant colony PCR identification Kit
重组菌落鉴定的方法有很多,为了兼顾鉴定的效率和准确率,很多科研人员选择使用PCR法鉴定重组菌落。其原理主要是选择合适的引物,根据灵敏的PCR扩增反应,将阳性宿主菌体内载体的目的片段扩增出来,方便地进行鉴定,无需进行菌体的过夜培养和质粒提取,大大地节省了时间和精力。
为了方便广大的科研人员,我们为您配备了专用于重组菌落鉴定的试剂盒,使用本公司研发的一管便携式PCR MasterMix预混系统,无需您一一加入各种成分,直接加入筛选到的单菌落,经过1小时左右的PCR反应和电泳检测即可得到重组菌落鉴定的结果。
产品特点:
方便快捷:省去了菌体培养和提取质粒的时间与费用,快速简便地鉴定重组子。
准确灵敏:鉴定的准确度达90%以上。
保存条件:
-20℃保存2年
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文献和实验调节电压为 20V (小槽)或 40V (大槽),电泳 15min ,使细胞充分裂解,将电压调高到 200V ,继续电泳 1hr ,照相。 7 .根据胶图粗略鉴定插入片段的大小及小片段率。 2 .菌落 PCR 1.取适量PCR薄壁管,置于冰上,每管先加入17.3ul的灭菌水。 2.用灭过菌的10ul小枪头挑取单克隆白斑至灭菌水中, 振荡混匀。 3.依次加入
法,在涂布有IPTG和X-Gal的筛选平板上,重组菌株为白色,未转入重组质粒的菌株为蓝色。 ◆ 可对小量提取的质粒DNA做限制性酶切,采用天为时代公司的质粒提取试剂盒,可快速提取多个样本,而且由于提取的质粒纯度高,不会有酶切切不开,影响实验的情况。 ◆ 也可直接用细菌菌落进行PCR反应,筛选存在目的片段的重组菌落。天为时代公司生产的一管便捷式PCR反应系统(MasterMix系列产品)特别适合这种方法。用灭菌的吸头挑取单个菌落到已加入MasterMix的PCR管中,加入特异引物,进行
表达载体 挑选了60 个菌落,运用目的基因 的上下游引物 做PCR,出来条带的有有52个 按照经验选取比较亮的14 个提取质粒,酶切和PCR双鉴定 结果仅有一个为阳性克隆,其余均为假阳性(假阳性主要考虑来源于未与载体结合的插入片段 ) 也难怪老板一口回绝 只是我需要做的基因太多,最凶猛的时候我一个星期要用两个200次的TianGen的质粒小提,累死人不偿命 后来我自己对着图谱研究 了一下(我所使用的是pCDNA
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