p53荧光素酶报告基因质粒(p53抑癌基因质粒)哪里卖

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北京百奥莱博专业生产供应p53荧光素酶报告基因质粒(p53抑癌基因质粒)哪里卖，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：p53荧光素酶报告基因质粒(p53抑癌基因质粒)哪里卖
品牌：百奥莱博
规格：1μg
编号：YT453
p53报告基因质粒是用于检测p53转录活性水平的报告基因质粒。p53质粒是以pGL6-TA质粒为模板，在其多克隆位点插入了多个p53结合位点，可以高灵敏度地检测p53的激活水平。

pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。

p53质粒的主要信息如下：

Base pairs	5659
p53 response element	20-73
Minimal TA promoter (pTA)	96-118
luc2 reporter gene	160-1812
SV40 late poly(A) signal	1847-2068
SV40 early enhancer/promoter	2116-2534
Synthetic neomycin phosphotransferase
(Neor) coding region	2559-3353
Synthetic poly(A) signal	3378-3426
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	3493-3512
ColE1-derived plasmid replication origin	3750
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	4541-5401
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5506-5659
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	5608-5627

p53质粒的图谱如下：



使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. p53可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒（YT273）。
3. 紫外照射、离子辐射等可以导致DNA损伤的作用或试剂可以激活p53，可以用作p53报告基因检测时的阳性对照。

储存条件：-20℃。

更多有关p53荧光素酶报告基因质粒(p53抑癌基因质粒)哪里卖的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销售以下产品：

·SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)
编号：YT052
英文名称：SDS-PAGE Sample Loading Buffer，6X
规格：2ml
本品是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，6倍浓缩的蛋白上样缓冲液，可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。

注意事项：
1. SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。
2. SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)必须完全溶解后再使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。


·7.5% NaHCO3溶液
编号：YT904
英文名称：7.5% Sodium Bicarbonate Solutioin
规格：100ml
本品用水配制，已经过过滤除菌，可以直接用于细胞培养或其他常规用途。

注意事项：在使用7.5% NaHCO3溶液的过程中要特别注意避免溶液被微生物污染。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

·末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)
编号：YT512
英文名称：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
规格：500U
本酶是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3"羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。

用途：寡核苷酸或DNA 3"羟基末端标记；DNA末端加尾(DNA tailing)；5"-RACE；合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为小牛胸腺。
活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3"羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：200mM potassium cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNase。
酶储存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassium cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。
失活或抑制：70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、氯离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
储存条件：-20℃。

使用说明：

1. DNA 3’末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待标记DNA————————————————————10 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X) ——————————————10µl
[α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50µCi)
TdT (20U/µl) ——————————————————2µl
补充无核酸酶的去离子水 —————————————至50µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：标记的效率和3’羟基末端的类型有关，3’突出末端的标记效率要显著高于3’缩进末端或平末端的标记效率。

2. DNA末端加尾(DNA Tailing)：
a. 参考下表格设置反应体系：
DNA*(代"片")段 ————————————————————1 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X)——————————————4µl
dATP or dTTP——————————————————130pmol
或 dGTP or dCTP (四种中通常只需加入一种)————60pmol
TdT (20U/µl)——————————————————1.5µl
补充无核酸酶的去离子水—————————————至20µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：在上述反应条件下，每个3’羟基末端可以加上100-130个dA或dT，或20-30个dC或dG。

3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。


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·CCK-8细胞增殖与毒性检测试剂盒(WST-8法)
编号：YT127
英文名称：Cell Counting Kit-8
规格：100次|500次|2500次|10000次
本试剂盒是一种基于WST-8而广泛应用于细胞增殖和细胞 毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。

WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成 橙黄色的formazan(参考下图)。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关 系。



WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先，MTT 被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可 以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳 定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽，灵敏度更高。

WST-8和WST-1相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。

本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒 性检测，或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。

本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，无须再进行任何配制等操作 。无须使用同位素，所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于 大批量样品的检测。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。

WST-8对细胞无明显毒性。加入CCK-8溶液显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵 活，便于找到最佳测定时间。

注意事项：
1. 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于96孔板周围一圈 最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS、水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸 发。
2. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测，如果待检测体系 中存在较多的还原剂，需设法去除。
3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。

储存条件：4℃，有效期一年。


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