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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
β-Catenin/TCF Mutation Probe For EMSA(10μM)
- 库存:
341
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
30μl
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(10μM)现货,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(10μM)现货
产地:国产|进口
英文名:β-Catenin/TCF Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的β-Catenin/TCF consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-β-Catenin/TCF的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。 一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
β-Catenin/TCF consensus oligo的序列如下:
5"-CCC TTT GAT CTT ACC-3"
3"-GGG AAA CTA GAA TGG-5"
EMSA突变探针-β-Catenin/TCF中β-Catenin/TCF的公认的结合位点发生了突变,从而使β-Catenin/TCF无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和β-Catenin/TCF的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和β-Catenin/TCF的结合的条带不会被抑制。参考下图。

一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
除β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(10μM)现货外,我公司正在打折促销以下产品:
F030623 FITC标记兔抗猴IgG抗体 Rabbit Anti-monkey IgG*FITC
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BL0920 RBITC标记兔抗人IgM抗体
维生素E油 2-Aminofluorene 10191-41-0
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2,2"-联吡啶 DTPA 366-18-7
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3-氨基异丁酸 Benzenesulfinic acid sodium salt 144-90-1
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5-氮胞苷 DL-Lysine monohydrochloride 320-67-2
ZCNXQ04 特级胎牛血清 500ml
β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(10μM)现货关键词:β-Ca,β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(10μM),YT217,β-Catenin/TCF Mutation Probe For EMSA(10μM)
·硫酸卡那霉素(细菌培养用)
编号:YT431
英文名称:Kanamycin sulfate
规格:1g
本品是细菌培养常用抗生素,用于配制含卡那霉素的LB或LB平板等。推荐工作浓度为10-50mg/L。也可以用于培养细胞的杀菌。对革兰氏阳性菌和阴性菌及支原体都有杀灭或抑制作用。用于真核细胞培养时,推荐工作浓度为100mg/L。可以配制成10-50mg/ml的储备液。储备液4℃稳定,-20℃可以长期保存。
CAS:25389-94-0
分子式:C18H36N4O11·H2SO4
分子量:582.58
储存条件:室温。
·AP标记驴抗山羊IgG(H+L)
编号:YT852
英文名称:AP-labeled Donkey Anti-Goat IgG(H+L)
规格:0.5ml
本抗体是碱性磷酸酶标记的驴抗山羊二抗,是用于Western、ELISA和IHC等的二抗。
宿主:驴
用途:WB,ELISA,IHC
WB:1:500-5000
ELISA:1:500-5000
IHC:1:500-2000
碱性磷酸酯酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酶(EC 3.1.3.1),是一类水解酶,通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,其去磷酸化作用的底物包括蛋白质、核苷酸和生物碱等,并在碱性条件下最为有效。该酶是一组同功酶的统称。常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline
Phosphatase, CIAP/CIP)被广泛用于二抗等的标记最终用于蛋白和核酸等的检测,例如在Western、ELISA、IHC、ICC、
Northern、Southern等时,催化BCIP/NBT等显色试剂显色或催化适当的化学发光试剂产生化学发光。本产品标记的就是小牛肠碱性磷酸酶。
本碱性磷酸酯酶标记驴抗山羊IgG(H+L)用于WB、ELISA和IHC的推荐稀释比例参考上表,实际实验操作过程中需根据抗原和抗体的具体情况适当调节二抗的稀释比例。
本抗体为用纯化的山羊IgG免疫驴,然后用亲和纯化柱对获得的抗血清进行纯化,并经过人、兔、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、马、鸡血清吸附纯化的优质二抗。对人、兔、小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、马、鸡血清蛋白几乎没有结合能力
本抗体如果用于常规的Western检测,以每次检测需10毫升1:1000稀释的二抗计,可以检测50次。
储存条件:-20℃,有效期一年。
β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(10μM)现货关键词:β-Ca,β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(10μM),YT217,β-Catenin/TCF Mutation Probe For EMSA(10μM)
·化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒
编号:YT032
英文名称:Chemiluminescent Biotin-labeled Nucleic Acid Detection Kit
规格:1000cm2
本试剂盒是一种通过Streptavidin-HRP及后续的ECL试剂来实现化学发光检测Biotin标记核酸的检测试剂盒。适用于Southern blot、Northern blot、ribonuclease protection assay (RPA)或EMSA等实验中,采用生物素标记的DNA或RNA探针时的检测。本试剂盒不适用于生物素标记蛋白的检测。
本试剂盒采用了高质量的Streptavidin-HRP Conjugate,HRP和Streptavidin共价交联的比例大于3,这样比采用Streptavidin和Biotin-HRP conjugate两种试剂进行检测要更方便,并且灵敏度更高。采用了非特异性结合比avidin更低的strepatavidin,使检测结果背景更低灵敏度更高。
本试剂盒没有提供生物素探针标记相关的试剂,生物素标记的DNA探针或EMSA探针的制备可以相应地使用百奥莱博的生物素标记DNA试剂盒(TdT加尾法)或EMSA探针生物素标记试剂盒(YT189)。本试剂盒可以用于检测至少10块10 x 10cm有生物素标记EMSA探针的膜,即共1000cm2。
试剂盒组份:
| ECL A液 | 55ml |
| ECL B液 | 55ml |
| Streptavidin-HRP Conjugate | 100μl |
| 封闭液 | 380ml |
| 洗涤液(5X) | 250ml |
| 检测平衡液 | 250ml |
储存条件:-20℃。
使用说明:
1. 在使用Biotin标记探针的情况下,完成Southern、Northern杂交及后续洗涤后,或RPA的转膜和交联后,或EMSA的转膜和交联后,可以使用本试剂盒开始检测。下面的检测过程中溶液的用量是用于一片10x10cm膜的量。如果膜较大或较小,各溶液的用量可以按比例放大或缩小。
2. 37-50ºC水浴溶解封闭液和洗涤液。
注意:封闭液和洗涤液必须完全溶解后方可使用,封闭液和洗涤液可以在室温至50ºC之间使用,但必须确保这两种溶液中均无沉淀产生,在冬天需特别注意。
3. 取一合适的容器加入15ml封闭液,再放入交联过的含有样品的尼龙膜。在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动15分钟。
4. 取7.5µl Streptavidin-HRP Conjugate加入到15ml封闭液中(1:2000稀释),混匀备用。
5. 去除封闭液,加入上一步中配制的15ml含有Streptavidin-HRP Conjugate的封闭液。在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动15分钟。
6. 取25ml 洗涤液(5X),加入100ml重蒸水或MilliQ级纯水,混匀配制成125ml洗涤液。
7. 将尼龙膜转移至另一装有15-20ml洗涤液的容器内,漂洗1分钟。
8. 去除洗涤液,加入15-20ml洗涤液,在侧摆摇床或水平摇床缓慢上洗涤5分钟。
9. 重复步骤8三次(共洗涤四次),每次洗涤时间均约为5分钟。
10. 将尼龙膜转移至另一装有20-25ml检测平衡液的容器内,在侧摆摇床或水平摇床上缓慢摇动5分钟。
11. 取5ml ECL A液和5ml ECL B液混匀,配制成ECL工作液。注意:ECL工作液必须现配现用。说明:从本步骤起操作方法和注意事项同Western实验的荧光检测。
12. 取出尼龙膜,用吸水纸吸去过多液体。立即将膜的样品面向上,放置到处于水平桌面上的洁净容器内或保鲜膜上。
13. 在尼龙膜的表面小心加上步骤11配制好的共10ml ECL工作液,使工作液完全覆盖尼龙膜。室温放置2-3分钟。
14. 取出尼龙膜,用吸水纸吸去过多液体。将尼龙膜放在两片保鲜膜或其它适当的透光薄膜中间,并固定于压片暗盒(也称片夹)内。
15. 用X光片压片1-5分钟。可以先压片1分钟,立即显影定影,然后根据结果再调整压片时间;也可以直接分别压片30秒、1、3、5分钟或更长时间,然后一起显影定影观察结果。
北京百莱博科技有限公司是凝胶迁移EMSA产品的专业生产供应销售商,恭候您的咨询选购β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(10μM)现货。
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文献和实验试剂 A. 生物素标记过氧化物酶 1 瓶 (100ul) 试剂 B. 链霉亲和素 1 瓶 (100ul) 临用前,将试剂A 和 B 与 10ml 的 PBS 缓冲液混匀即可 .( 备注 : 不含二抗 )
浅析染色质免疫沉淀(ChIP)技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性
Tcf-4 直接参与到 enhance E 的调控中。此结果与 Hatzis 等人 [25] 对直肠癌细胞系 LS174T 做的 ChIP-CHIP 测得的结果一致,证实了一直以来研究者关于 myc 存在远端增强子的猜测。类似地,有研究表明 β-catenin 与 FGF2 相互作用,影响神经干细胞增殖或分化,然而具体如何协同调控增殖或分化进程尚未知,直到 Israsena 等人[10]用 ChIP 试验证明了 β-catenin 仅在 FGF2 存在时与 neurogenin 启动子直接结合
7.5, 150 mM NaCl, and1% (v/v) Triton X-100. 7. Suitable SDS-PAGE and transfer setup as in Section 2.4.1 . 8. Protein Sample Loading Dye (4×) as in Section 2.4.1 . 9. Nitrocellulose or PVDF membrane. 10. Mouse anti-β-catenin antibody (available
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