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冷藏
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长期
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294
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北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100ml×3
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文献和实验试剂 公司),二甲基亚砜(DMSO),苏木精染液,伊红染液;TGF-β1免疫组织化学染色试剂盒,DAB显色试剂盒。B5060EX二氧化碳培养箱(德国Heraeus公司产品),37XAZ倒置生物显微镜(上海光学仪器厂),Olympus光学显微镜,DG-3022型酶联免疫检测仪(南京华东电子管厂),YS-875A净化工作台。 方法 1 MTT法检测不同浓度的苦参素对NIH3T3细胞增殖的影响 用0.25%胰蛋白酶消化单层培养NIH3T3细胞,用含10
-1:5000的稀释度,用1%BSA-PBS(含0.05%TWEEN20)稀释 ④ 显色底物缓冲液 A.HRP标记二抗底物缓冲液 DAB KIT(KPL LOT NO YM107 CAT:54-10-00), Tris Buffer 3滴,DAB Substrate 3滴,Peroxide solution 2滴于5ml蒸馏水中,避光,混匀 B.AKP标记二抗底物缓冲液 AKP缓冲液: 0.1mol/L Tris-HCL(PH9.5), 0.1mol/L NaCL
d、 加入30 ml不完全培养基,同法离心洗涤一次。然后将细胞重悬浮于10 ml不完全培养基,混匀。 e、 取骨髓瘤细胞悬液,加0.4%台盼蓝染液作活细胞计数后备用。细胞计数时,取细胞悬液0.1 ml加入0.9 ml台盼蓝染液中,混匀,用血球计数板计数。计算细胞数目的公式为:每毫升细胞数=4个大方格细胞数×105/4;或每毫升细胞数=5个中方格细胞数×106/2 ⑶ 脾淋巴细胞的准备 取已经免疫的BALB/c小鼠,摘除眼球采血,并分离血清作为抗体
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