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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Human Culture Cell Genomic DNA
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
30 μg
K562 DNA是从人慢性粒细胞白血病细 胞系继代培养的细胞中纯化得到的,作为 一个对照用于单位点探针分析方法中的 多数步骤。该DNA 也可作为参照用于适 当的酶切消化后可变数目串联重复序列 (VNTR) 等位基因片段大小的确定。由于 实验室在操作方案和分析方法上的不同, 得到的K562 片段大小可能会有细微差 别,本产品浓度为0.4–1.0μg/μL。
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文献和实验做实验前要先学会冻存,以备自己在后面的实验中能保持同一来源、稳定可靠的细胞,且可减少污染或其它不利影响。1、影响冻存细胞活性的因素(1)细胞冻存保护剂:常用的有二甲基亚砜(DMSO)和甘油,常用的浓度为5%-10%(90%小牛血清)。DMSO对二倍体细胞的毒性较甘油小。(2)细胞悬液的冻结速度:慢冻时冰冻在细胞外形成,因此不致损害细胞。多数细胞以每分钟下降1℃的速度,降至-20℃冻结。均可获得满意效果。(3)保存温度:液氮罐,可达到-196℃,此时所有的物理化学活动均降至最低限度,以保证细胞
/L KAc(4) RNaseA 10mg/ml(5) 异丙醇(6)灭菌ddH2O或TE3. 仪器: 离心机, 恒温水浴, 台式高速离心机,电泳装置二 实验程序1取幼嫩的组织材料1-2g,用蒸馏水冲洗干净,再用灭菌ddH2O冲洗2次,放入经液氮预冷的研钵中,加入液氮研磨至粉末状,用干净的灭菌不锈钢勺转移粉末到加有500μL提取液的离心管中,轻轻混匀。2 向管中加入50μL20%SDS溶液,混匀,不可过于强烈震荡以防基因组DNA断裂 ,65℃保温10min,并不时摇动。3 加入150μL 5mol
培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代(图1),16天后第二代(图2),22天后第三代(图3),并做a-actin免疫细胞化学鉴定(图4)。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
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