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常温运输,介质需4℃保存,PMSF 需-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
One-Stop MBP-Tagged Protein Miniprep Pack
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
20 次
MBP(麦芽糖结合蛋白,Maltose Binding Protein)标签蛋白大小为 40kDa,由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合 蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达,MBP可以融合在蛋白的 N端或C端。MBP融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化,结合的融合蛋白可 用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除MBP融合部分,可用位点特 异性蛋白酶切除。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的 重组蛋白。由于MBP融合蛋白原核表达载体具有表达效率高,易于纯化等优点。在 现代分子克隆中MBP常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化MBP融合蛋白的试剂盒,它具有下列特点:
1. 一站式套装,含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱,操作非常方 便。
2. 专一性强,一次过柱即可获得纯度高达90%的MBP融合蛋白。
3. 采用麦芽糖温和洗脱,无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
一站式MBP标签蛋白纯化套装使用及效果
详细使用步骤请参见使用手册。
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文献和实验填料 根据亲和层析的几种应用方向,亲和层析的填料主要分为标签蛋白纯化填料、抗体及抗体片段纯化填料、族特异性亲和填料以及预活化填料四种。 1. 标签蛋白纯化填料 为了简化纯化流程以及方便后期的检测,在进行重组蛋白表达时往往会加入标签。常用的标签包括His标签、GST标签、Strep标签及MBP标签等 (表8)。His标签由于分子量很小,几乎不会影响靶蛋白结构和功能而被广泛使用。GST和MBP标签常用于促进蛋白的可溶表达,尤其对于难表达的真核细胞蛋白和病毒蛋白有很好的促溶表达能力。Strep
老话说的好,巧妇难为无米之炊,要做好标签蛋白质的纯化实验,首先得选择合适的填料和预装柱,以达到事半功倍的效果。我们今天就来看看 Cytiva 标签蛋白填料的大家族,一起 pick 最适合您蛋白质研究的填料吧! 蛋白标签(Protein Tag) 所谓蛋白标签(Protein Tag)是指利用 DNA 体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪、和纯化等。常用的标签有His、GST、Strep、MBP、Flag 和组合式的双标签。Cytiva 可为
。 绝招四:纯化实验中常用的亲和标签汇总 Cytiva 提供多种亲和标签纯化产品,可用于纯化 His、GST、Strep(II)/ Twin-Strep、MBP 这些标签融合的重组蛋白。不同的标签蛋白在分子量、促溶性、结合特异性等方面各有特点,个性鲜明。 图 2:Cytiva 产品可用于纯化的主要亲和标签的性质对比 绝招五:纯化得到的组分中没有或很少目的 His 标签蛋白的主要原因分析 若目的 His 标签蛋白正常表达(使用
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