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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输
- 保质期:
一年
- 英文名:
One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
2 mL
基于His-Ni亲和层析的蛋白质纯化方法是目前分离纯化重组表达蛋白质的重要 方法,其原理是用基因重组的方法使待纯化蛋白的N端或C端携带一段His序列(一 般是6个His),然后利用偶联了Ni离子的琼脂糖与His的亲和作用而将His-标记蛋 白与其他蛋白质分开,与Ni-琼脂糖结合的蛋白最后用咪唑溶液洗脱即可。本产品就是专门用于上述实验的一站式产品,它具有下列特点:
1. 一站式套装,含所需的各种溶液和耗材,用户只需要提供表达His蛋白的细菌即 可,非常方便。 2. 每次可以处理30-100 mL的表达菌液,适合初步筛选和鉴定。
3. 提供4 mL浓度为50%的镍柱介质,本介质可以反复使用多次。
4. 专一性强,一次过柱即可获得纯度高达95%的His-标记蛋白。
一站式His标记蛋白质微量纯化套装使用及效果
详细使用步骤比较复杂,请参见使用手册。
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文献和实验如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
较大的总RNA,mRNA保留比较完整,纯度高,多用于RT-PCR或Real-Time PCR分析;玻璃纤维素膜常用于纯化片段较小的RNA片段,纯度较高,经常用于microRNA等小RNA的分离实验;磁珠法一般用于RNA含量较少的样本,获得的RNA量比膜吸附法高,但纯度略低。 在进行高通量药物筛选,干细胞或胚胎细胞等研究时,经常需要对单个细胞或数百个细胞的微量样本进行分析,这时,以上几种常规纯化方式均很难完整地保存RNA信息。直接裂解细胞是获得少量细胞RNA的最好方法,不经介质吸附洗脱
本法反应温和,对抗原、抗体免疫活性影响小,已被广泛应用。缺点是标记率较低,一般为20~40%。 1.原理此法是利用乳过氧化物酶(Lactoperoxidase)有促进微量过氧化氢对125I-的氧化作用,生成125I+,并标记在多肽、蛋白质酪氨酸分子上。 2.方法以标记蛋白质抗原为例。 (1)反应液组成:蛋白质2~5μg溶于磷酸缓冲液10~25μl中,加入Na125i 1m Ci(10μl)、乳过氧化物酶溶液25ng(10μl)、H2O2200ng(10μl
本法反应温和,对抗原、抗体免疫活性影响小,已被广泛应用。缺点是标记率较低,一般为20~40%。 1.原理此法是利用乳过氧化物酶(Lactoperoxidase)有促进微量过氧化氢对125I-的氧化作用,生成125I+,并标记在多肽、蛋白质酪氨酸分子上。 2.方法以标记蛋白质抗原为例。 (1)反应液组成:蛋白质2~5μg溶于磷酸缓冲液10~25μl中,加入Na125i 1m Ci(10μl)、乳过氧化物酶溶液25ng(10μl)、H2O2200ng(10μl
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