- ¥190
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY131006-100
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输，4℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
RIPA Lysis Buffer（S）
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
100 mL
RIPA（Radio Immunoprecipitation Assay）裂解液是一种传统的细胞组织快 速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样 品可以用于常规的Western、IP等实验。 本产品裂解强度较强，对膜蛋白、胞浆蛋 白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录 因子均有很好的效果，本产品含有各种蛋 白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各 种蛋白酶对目的蛋白的降解。
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文献和实验1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitor(sigma cat no P8340) and 10μl phosphatase inhibitorRIPA buffer 最终浓度1M Tris-HCl pH7.5) 5 ml 50mMNaCl 0.87g 0.15 MNa-deoxycholale 0.1g （1%）0.5M EDTA(pH8.0) 0.8mlNaF 41 mgNonidet P40 1 ml （1%）Aprotinin
2，左条带为使用普通强裂解液提取的蛋白样品，右条带为柱式法提取的蛋白样品，可见使用柱式法法提取的样品胶孔中可明显改善样品滞留、拖带的情况发生。 图 2：同种样品分别使用裂解液法和柱式法进行 WB 样品制备，SDS-PAGE 电泳后考染图 图片来源：英文特 WB 蛋白样品制备过程中出现样品粘稠的情况并不代表样品提取失败，而是样品裂解较为充分的表现，但是如果放任不管则会引发一系列连锁效应，最终导致 WB 实验失败。选择合适的方法进行处理。成功获得高质量的蛋白样品，是 WB 实验成功必不可少
细胞沉淀后，加入预冷的 RIPA 液（含PMSF），RIPA 液的用量：按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。轻轻混匀细胞悬液，用振荡器在 4℃ 振荡 15min 以裂解细胞。 用经蒸馏水预冷的橡皮或塑料细胞刮棒将贴壁细胞转移至一离心管中。 于 4℃，10000 rpm 离心裂解液 15 min，迅速转移上清至另一离心管中，弃掉沉淀。 将 Agarose protein A+G 珠子混匀：用预冷的 PBS 洗涤 Agarose protein A+G 珠子两次，并将其用 PBS 调
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