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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Flat end DNA add A tail Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
50次
DNA加A尾试剂盒
英文名:Flat end DNA add A tail Kit编号:KL352
本试剂盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分钟左右完成整个过程。由Pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA*(代"片")段,如该平末端DNA*(代"片")段需要和T载体相连接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接。
试剂盒组分:
Taq DNA polymerase——————————50μl
10×A-tailing buffer—————————50μl
dATP Mix———————————————50μl
操作步骤:
1. 平末端PCR 产物用PCR 清洁(无非特异扩增)或者胶回收纯化(有非特异扩增)。
2. 纯化好的平末端DNA 片段按以下反应体系加A尾:
平末端DNA 片段—————————7μl(不超过1μg)
dATP Mix————————————1μl
10×A-tailing buffer——————1μl
Taq DNA polymerase———————1μl
3. 轻轻混匀后72℃保温20-30 分钟。
4. 加A 尾的产物可以不需要再次清洁或者胶回收纯化,可直接用于连接反应。
储存条件:-20℃。
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文献和实验【讨论】关于miRNA inhibitor加胆固醇尾在细胞转染中的应用
liuchao8510 有没有人在细胞转染中应用加硫代硫酸修饰的胆固醇尾的miRNA inhibitor,加胆固醇文献中说是for delivery in vivo,硫代硫酸是为了stability,那在转染细胞的时候胆固醇会不会对转染效率造成影响,转染试剂用Lipofectamine RNAI MAX还是Lipofectamine 2000?有没有人比较过这种修饰的inhibitor与2-OMe修饰的inhibitor在细胞中对对应miRNA抑制效率的差别
gaoyongxin 如何给提取的RNA加A尾(poly A) zjubell 先问一下,你有何目的? 如果是真核的,提的RNA,一般都带polyA, 如果是原核的,那你要加A做什么? gaoyongxin 我提的是血清的RNA 但是后期要做microRNA的qRT-PCR zhujoker 请参考下面这篇文献: PNAS
20万元转让DNA抽提系列试剂盒 本试剂盒是由复旦大学博士后研制。考虑到目前国内大多数实验室研究经费的实际情况,我们力求研制出性价比比较高的试剂盒。配方、生产工艺、生产材料经过一系列优化,操作方便、生产设备简单、生产材料价廉。生产成本是目前国内最低的。用该系列试剂盒分离、纯化的DNA纯度不亚于国外同类试剂盒,而且DNA的得率较高。经过三年的销售使用,客户反映该系列试剂盒质量可靠、价格低廉,是目前市场上性价比最高的DNA抽提系列试剂盒。该试剂盒使用率非常高。深受用户欢迎。 本系列试剂盒
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