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- KALANG
- 中国大陆
- KL482
- 2025年07月13日
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长期
- 英文名：
N-Myc plasmid（with CMV promoter）
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大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
1μg
N端Myc标签融合蛋白质粒
规格：1μg编号：KL482
英文名：N-Myc plasmid（with CMV promoter）
本质粒是用于在哺乳动物细胞中表达N端和Myc tag(Myc标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多克隆位点的5"端含有一个可以编码Myc标签的序列，因此可以表达出含有Myc标签的融合蛋白，可以方便地使用抗Myc的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
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文献和实验一，酵母表达系统毕赤酵母表达系统（invitrogen公司）：分泌型质粒pPIC9K，宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha （甲醇诱导）宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二，原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签（N端）：PET5-(a)氨苄抗性带His标签（N端）：PET28-(a)卡那抗性带His标签（C端）：PET24-(b)卡那抗性带His标签（C端）：PET21-(a)氨苄抗性带His标签（N端）+TrxA(硫氧还蛋白)：PET-32
。 5，改良版PET-NusA：带His标签（N端）+NusA(角质蛋白A) 说明：此载体表达的融合蛋白的N端带有His标签，可以通过一步亲和层析得到纯化，NusA(角质蛋白)与目的蛋白之间含有thrombin(凝血酶位点)和Linker（102bp）序列。NusA可以让超过95%的外源蛋白获得可溶性的原核表达，但NusA不具有氧化性，分子伴侣的功能比较低。 四，真核表达质粒 PVAX1，pEGFP-N2，pGL-3control，pMir-report pCMV-Myc
【求助】MDCK转染与免疫荧光问题，解决问题追加丁当，谢谢！
其功能，所以选择用标签染色的方法证实转染效果） 在每次免疫荧光之前我都会看一下GFP的荧光情况，有特异性的荧光表达。 然后我会对转染质粒的细胞进行染色。实验组的一抗我用的是c-myc,对照组1用的一抗为AQP1和c-myc,对照组3一抗用的是AQP1 试验结果：对照组3即阳性对照，能出现阳性结果，说明免疫荧光的操作没有问题。 对照组2，有GFP的荧光，说明至少转染GFP质粒没有问题。 但是，就是没法染出实验
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