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- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
二年
- 英文名：
Magic Vector G
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
2 μg
本产品是高效零背景通用（General）克隆载体，其无背景克隆原理是该载体 携带一自杀基因，多克隆位点在该基因之中，自身环化的载体其自杀基因正常表 达，转化细胞不能生长。只有当外源DNA插入片段打断该自杀基因的正常编码顺 序，转化细胞才能生长，所以最后得到的转化子几乎都是含有插入片段的重组子。
1. 零背景，阳性率一般为95%，不用蓝/白筛选，尤其适合于构建文库用。
2. 适用于绝大部分常用的E.coli菌株，而市场上的同类产品一般都需要特殊的菌株 作宿主。
3. 克隆步骤简化，可一小时内即可完成。载体无需完全酶切，无需去磷酸化，无 需要纯化片段。
4. 多拷贝复制起始位点（ori），便于大量制备质粒。
5. 质粒用量仅为常规方法的1/5。
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文献和实验注意的是，Illumina测序仪使用的桥式PCR与传统的桥式PCR有所不同，它会交替使用Bst 聚合酶 进行延伸反应以及使用甲酰胺（formamide）进行变性反应。这样，经过桥式PCR扩增之后，也会在固相载 体上形成一个个的模板“克隆”。一块芯片的8条独立“泳道”上每一条泳道都可以容纳数百万的模板“克 隆”，这样一次就可以同时对8个不同的文库进行测序。 经过上述PCR扩增步骤之后，所有的模板都被线性化处理（linearization）而形成单链模板，接着与测 序引物退火、杂交。随后使用修饰的DNA聚合酶和四
8g（湿重），以100ml 1mol/LNaCl和100ml 蒸馏 水先后在漏斗上洗涤，抽干后移至小三角瓶内，加入6.5ml 2mol/L NaOH、1.5ml 环氧氯丙烷、15ml 56% 1，4－二氧六环，于40℃的恒温摇床中振摇活化2h后取出，在烧结漏斗中以 蒸馏 水和0.2mol/L，pH9.5 Na 2 CO 3 -NaHCO 3 缓冲液洗涤、抽干。 3．模拟过氧化物酶与载体的连接 将10ml 牛
相关专题shRNA设计 RNAi由于可以特异地使基因沉默或表达量降低而成为生物实验的强有力工具。其中shRNA设计在慢病毒的构建上应用颇广，本文对shRNA设计原则和操作技巧 进行介绍。 1.克隆到shRNA表达载体 中的shRNA包括两个短反向重复序列，中间由一茎环(loop)序列分隔的，组成发夹结构，由polⅢ启动子控制。随后在连上5-6个T作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。 2.两个互补的寡核苷酸 两端须带有
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