- ¥190 - 1980
- KALANG
- 中国大陆
- KL3401
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
2～8℃
- 保质期：
长期
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
50次×50μl|100次×50μl
TUREscript One Step RT-PCR Kit(一步法反转录PCR试剂盒)
规格：50次×50μl|100次×50μl
编号：KL3401
产品储存：－20℃保存，有效期6个月。
制品说明：本试剂盒是专为一步法RT-PCR 实验配制的，使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR 扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂，避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括突变改造M-MuLV H Minus 逆转录酶、热启动HotMasterTaq DNA 聚合酶和RNasin 抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR 扩增的优化独特反应体系。
本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H 活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA 合成以及高比例的全长cDNA 文库的构建等。同时该酶提高了耐热性，可以在42-50℃反转录，提高了复杂二级结构，GC 含量丰富模板反转录效率。
适用范围：适用于高拷贝、低拷贝基因检测；部分高GC 含量或具有复杂二级结构的RNA 模板。
建议反应体系（50 μl）：
注意：2×RT-PCR Buffer 低温时可能有结晶析出，应手心加热或者涡旋振荡恢复融解后使用。短期使用可放4℃冰箱。
注意：引物浓度请以终浓度0.2-0.6μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。如果同进行多个反应，先按比例配成混合液，振荡混匀后，按每管50-Xμl (X为模板量)分装。
注意事项：
●避免RNase污染。
●为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板
●不同的片段，所需最佳RNA模板用量不同，过多的RNA会抑制反应，建议根据反应调整模板用量。
●不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 合成cDNA。
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文献和实验Two-Step RT-PCR protocol We will provide both one-step and two-step protocols for RT -PCR . We recommend the two-step protocol for this class. In the one-step protocol, the components of RT and PCR are mixed in a single tube
是因为荧光标记得影响），要看你摸的时候不同循环的扩增产物的量之间的关系，在相邻之间的差异基本复合线性增长才是线性期。 一步法还是二步法:我一直不建议采用一步法，因为逆转录酶很贵，就坐一次PCR，多可惜啊！还有RNA。而且反转录了之后可以做10－20次，还可以摸条件找原因。不要以为一步法是盒子，实际上是一样的，操作没有什么不同，还没办法摸条件，早该淘汰了（特指RT-PCR过程中）。对于少量的标本用1ug的反转录酶既可以了，或者用于预实验都是很好的，但是P的时候要多加一点，之所以这些话总是不确定是因为
SuperScript III One-Step RT-PCR System with Platinum® Taq High Fidelity
for 25 or 100 amplification reactions of 50 µl each. Note: This kit has been optimized for end-point RT-PCR. For quantitative real-time RT-PCR, use the SuperScript™ III Platinum® One-Step Quantitative RT-PCR System. 实验
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