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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Instant Hotstart PCR Mix
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
- 规格:
1.5 mL
本产品预混的含有优化浓度的高纯度HotStart Taq DNA聚合酶,dNTPs, Mg2+,反应缓冲液和稳定剂等成分的即用型2倍浓度的PCR溶液。该产品使用方 便,扩增性能强,特异性好,适合大规模基因检测、多重PCR、半定量PCR实验 和微量DNA模板的检测。PCR产物3' 端附有一个突出的“A”碱基,纯化后可直接 用于T载体克隆。本产品有添加红色染料和不添加染料两种。使用含染料的产品在 PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接进行电泳,也可经过纯化处理,以 用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。 1. 高特异性,抗体型热启动,确保高效的常温抑制效果。
2. 性能稳定,实测4℃三个月或室温(25℃)一周后扩增性能无显著变化。
3. 操作方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR实验, 室温下配制反应体 系,热循环仪无需预热。
4. 快捷,操作步骤已经最大限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
5. 产物可直接用于T载体克隆,不需要额外的加A反应。
即用型热启动PCR 试剂盒使用及效果
将本产品25 μL与用户自备的模板,引物和水共25 μL混合后,直接进行PCR反 应(PCR参数由用户自己确定),反应结束后直接取10 μL电泳检查扩增结果。
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文献和实验Polymerase Chain Reaction--热启动PCR
This procedure is a "hot start" PCR cycle for use with large primers. PCR mass-produces DNA contained in the source plasmid between the two primer-binding sequences, eventually producing linear DNA starting with Primer 1, continuing
PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
酶。 图 1.非特异性扩增(左图)与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增(右图)。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液,您只需添加模板和引物,然后,开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤,使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样(注意:确保染料与下游应用兼容)。直接
增加PCR特异性:引物设计、退火温度、递减PCR、引物浓度纯度和稳定性、热启动
1、引物设计 细心地进行引物设计是PCR中最重要的一步。理想的引物对只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火。设计糟糕的引物可能会同扩增其他的非目的序列。下面的指导描述了一个可以增加特异性的引物所具有的令人满意的特点: ① 典型的引物18到24个核苷长。引物需要足够长,保证序列独特性,并降低序列存在于非目的序列位点的可能性。但是长度大于24核苷的引物并不意味着更高的特异性。较长的序列可能会与错误配对
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