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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 注册证号:
10×0.1 mL
- 保存条件:
常温运输,4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Gel Based TAL Kit
- 库存:
60
- 供应商:
泽叶生物
本试剂盒是基于鲎试剂(Tachypleus Amebocyte Lysate,TAL)的内毒素半 定量检测产品,鲎试剂为鲎科动物东方鲎(Tachpleus tridentatus)的血液变形细胞 溶解物的冷冻干燥品。在适宜的温度,pH值条件下,细菌内毒素可以激活鲎试剂中 的凝固酶原,使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。通过观察有无凝胶形成作为反应的终 点,应用此方法可以定性检测或半定量内毒素。本产品具有下列特点:
1. 特异性好,能有效阻断鲎反应中的旁路反应(葡聚糖反应),避免假阳性的出现。
2. 操作比较简单,经济,不需要专用测定设备。
3. 可溶性好,产品未加任何赋形剂。
4. 质量稳定,抗干扰能力强。
凝胶法内毒素半定量试剂盒使用及效果
按 0.1mL/支加无内毒素水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解,各反应 管中分别加入0.1mL阴性对照液,阳性对照液,样品,或样品阳性对照液。封闭管 口,轻轻摇匀,垂直放入37℃的恒温器中温育60分钟±2分钟,温育期间避免振动。 将试管从恒温器中轻轻取出,缓慢倒转180°。若管内的内容物呈坚实凝胶,不变 形,不从管壁滑脱为阳性,记录为(+);不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并 从管壁滑脱为阴性,记录为(-)。
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文献和实验徐修礼,张建芳,樊新,孙怡群 (第四军医大学西京医院检验科,陕西 西安 710032) 摘要:目的 探讨革兰阴性杆菌感染患者和正常健康人群血浆内毒素水平及临床意义。方法 分别用定量动态比浊法和鲎试剂定性凝胶法检测革兰阴性菌感染患者和正常健康对照血浆内毒素含量。结果 正常对照组血浆内毒素定量3.30±1.73pg/ml,定性全部为阴性;革兰阴性菌感染组内毒素945±2244.43 pg/ml,定性阳性率为68.19%。经SPSS统计软件T-检验分析,对照
对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂),匀浆后抽提总蛋白(或核蛋白)。实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂(或核蛋白抽提试剂)抽提总蛋白(或核蛋白)。2. 蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE):将准备好的样品液和预染
)。 2. 蛋白质定量:按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。 3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳 (SDS-PAGE):将准备好的样品液和预染蛋白marker分别上样,标准加进第一个孔中,电泳分离蛋白。 4. 蛋白质转移到PVDF膜,按Bio-Rad蛋白转移装置说明组装滤纸凝胶纤维素夹层,30mA恒流条件下,4°C转移过夜。 5. western blot膜的封闭和抗体孵育 膜在5%脱脂奶粉溶液中室温孵育1小时以封闭膜上的非特异结合
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