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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
50次×50μl|100次×50μl
TUREscript One Step qRT-PCR Kit (一步法荧光定量反转录PCR试剂盒)
规格:50次×50μl|100次×50μl编号:KL4101
产品组成、储存、浓度:
储存:-20℃ 保存,有效期12个月。
产品说明:本制品是采用SYBR Green I 嵌合荧光法进行Real Time PCR 的专用试剂,用本制品进行Real Time qRT-PCR 可在同一反应管内连续进行。反应过程中无需打开管盖添加试剂并可对扩增产物进行实时检测,避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。非常适合于微量RNA 尤其是微量RNA病毒的检测。本试剂盒包括最适合Real Time PCR的突变改造M-MuLV H Minus逆转录酶(TRUEscript RTase)、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasin抑制剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性。同时该酶提高了耐热性,可以在42-50℃反转录,提高了复杂二级结构,GC含量丰富模板反转录效率。而采用优质热启动酶HotMaster Taq DNA Polymerase可以最大限度的减少PCR扩增全程中的非特异性扩增产物产生,大大提高了荧光定量PCR反应的精确性。本制品可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量检测,重复性好,可信度高。
适用范围:适用于高拷贝、低拷贝基因检测;部分高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。
注意事项:
● 当同时需要进行数次Real Time One Step qRT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液(Master Mix,其中包括RNase-free ddH2O、Buffer、各种酶等),然后再分装到每个反应管中。这样可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
● 使用Enzyme Mix和TRUEscript RTase时,分取之前要小心地瞬间离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有高浓度的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
● 2×qRT-PCR Mix内含Sybr Green I,保存或配制One Step qRT-PCR反应液时应避免强光照射。
● 本制品不含Rox Reference Dye,部分需要用Rox染料校准孔间差异的荧光定量PCR仪器可另外选购Rox Reference Dye(货号PC38)。
● 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板。
● 不同的片段,所需最佳RNA模板用量不同,过多的RNA会抑制反应,建议根据反应调整模板用量。
● 只能使用特异性引物,不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 进行反应。
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文献和实验RNase H活性缺失的莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶(M-MLV Reverse Transcriptase)的高效反转录合成单链cDNA的试剂盒; All-in-One? qPCR Mix 基于SYBR Green的All-in-One? qPCR 检测试剂盒; All-in-One? miRNA qRT-PCR Detection Kit 采用Poly A加尾法的miRNA qPCR 检测试剂盒;
at least 2 reference genes for subsequent reactions and normalisation. Inlcude your genorm M values when publishing qPCR data. Primer selection Main article: Choosing primers for qPCR Choosing suitable primers is an early crucial step in your qPCR experiment
用Bioteke One-step SYBR real-time RT-PCR Kit 进行荧光定量PCR后,结果如图3。 实验结论 经过不同样品的扩增后,可以看出BioTeKe公司的2×SYBR real-time PCR premixture Kit比T公司的荧光定量PCR试剂具有较高的扩增效率,在荧光值和灵敏度方面也有巨大的优势。另BioTeke公司的一步法Real-time PCR试剂盒也拥有很好的扩增效果。 同时,为了进一步证明BioTeke的实时荧光定量产品的质量,BioTeke公司
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