第一链cDNA Synthesis Super Mix fo

第一链cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR

编号：KL0292
英文名：First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(+gDNA wiper)
本品基于Reverse Transcriptase ，该酶是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上经过多点突变得到的全新逆转录酶，热稳定性提高，在50℃下活性最高，且可耐受高达55℃的反应温度，适用于具有二级结构的RNA模板的逆转录，能稳定可靠地合成cDNA。

RNA模板首先用4×gDNA wiper Mix短暂处理，可彻底去除残留的基因组DNA污染，保证后续的定量结果更加可靠，并且可简化qPCR引物设计，无需跨外显子/内含子仔细设计；随后直接加入5×Super Mix II，即可立即进行逆转录。

5×Super Mix II中含有逆转录反应所需的所有组分 (Buffer、dNTP、Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Random primers/Oligo dT primer mix) ，并可同时终止4×gDNA wiper Mix，保证cDNA的完整性。RNA模板的体积最多可加到总体积的60%，非常适合于低浓度RNA模板的逆转录反应。4×gDNA wiper Mix和5×Super Mix II在-20℃不会冻结，使用方便。

该产品适用于两步法RT-qPCR检测，针对qPCR进行特别优化，比例优化的Random primers/Oligo dT primer mix，使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始，最大程度保证了qPCR结果的可重复性。逆转录产物兼容SYBR Green和探针法qPCR。

产品组份：
RNase free ddH2O————1 ml×2
4×gDNA wiper Mix————400 μl
5×Super Mix IIa————400 μl
5×Control Mixb————40 μl

a 包含Buffer、dNTP、Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Random primers/Oligo dT primer mix。
注：与First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(SY0291)中的5×Super Mix成分不同，不可以混用。
b 除不含Reverse Transcriptase外，其余成分与5×Super Mix II相同，用于配制对照反应。

质量控制

所有组分经检测均无核酸外切酶，核酸内切酶，RNase残留。
功能检测：以1 pg-1 μg HeLa cell total RNA为模板，测试qRT-PCR性能。以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线，R2>0.990，斜率在-3.20到-3.60之间；在1 μg HeLa cell total RNA中混入100 ng human genomic DNA，经gDNA wiper Mix处理后，进行qRT-PCR，对照反应的Ct值>40。

储存条件：-20℃。