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植物线粒体DNA提取试剂盒报价
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2~8℃
一年
778
北京百奥莱博科技有限公司
50T/100T
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销售植物线粒体DNA提取试剂盒报价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:植物线粒体DNA提取试剂盒报价规格:50T/100T编号:XH002品牌:百奥莱博储存条件:2~8℃,有效期一年。DNASE I -20℃保存。使用前,在DNase I中加入600ul(50T)或者1200ul(100T)的DNA酶反应液,分装后-20℃保存三个月,如果超过三个月,活性可能会降低,请自行订购DNASE I。线粒体裂解液使用前常温保存,如有沉淀可37℃水浴溶解,不影响使用。三,说明线粒体DNA提取的关键是尽可能的去掉核DNA。本试剂盒利用差速离心得到比较纯净的线粒体,再利用DNA酶消化和裂解缓冲系统等多步骤去掉核DNA,最后得到纯净的线粒体DNA。可用于PCR等对纯度要求较高的实验。本试剂盒用于从植物叶片中分离出完整而纯化的线粒体。适合于田间采摘或者实验室培养的植物叶片中线粒体DNA的提取制备。四,操作步骤准备工作:在DNASE I中加入600ul(50T)或者1100ul(100T)的DNA酶反应液,适当分装后-20℃保存。线粒体裂解液保存于常温,如有沉淀37℃水浴溶解,离心机温度下降到4℃(2-8℃),如无低温离心机,也可以常温离心,并将离心时间为10min的改为5min,但最后所得DNA品质及产量可能会有一定影响。1. 样本采集前处理:无论田间自然生长还是实验室组织培养,采摘前须避光生长24-48小时,以减少叶片组织中糖类及叶绿体含量。取适量植物细胞裂解液,加入0.5% β-巯基乙醇,10ml 植物细胞裂解液加入50ulβ-巯基乙醇,混匀,形成植物细胞裂解液/β-巯基乙醇溶液,此溶液可2-8度保存一个月。2. 叶片用蒸馏水清洗2-3次,滤纸吸干,有条件请用液氮研磨叶片1-2克,研磨完后,取800mg左右研磨的叶片粉,加入1.5ml预冷的植物细胞裂解液/β-巯基乙醇溶液,混匀。如果无条件(无液氮),请预冷研钵,取洗过的叶片1000 mg,用剪刀剪为碎块放入玻璃匀浆器或者研钵中。加入1.5ml预冷的植物细胞裂解液/β-巯基乙醇溶液,冰上研磨至看不见明显组织块;3. 将研磨物放置合适的离心管,4℃,1000× g 离心5 min;4. 将上清转移到一新的离心管中,在沉淀中加入0.5ml Lysis Buffer/β-巯基乙醇溶液,混匀,再次4℃,1000× g 离心5 min,取上清;合并两次上清,将上清4℃ 1000× g 再次离心5 min。5.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 16,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分,可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管,线粒体沉淀在管底。6. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀,4℃,1000× g 离心5 min;7.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 16,000 × g 离心10 min。弃上清,高纯度的线粒体沉淀在管底;8. 加入100ul DNA酶反应液重悬线粒体,吹打均匀后,再加入10ul DNASE I溶液(见准备工作),混匀,37℃水浴10min。此步为消化线粒体表面吸付的核DNA。4℃, 12,000 × g 离心5 min。尽可能的弃上清,再加入200ul TE 重悬线粒体沉淀,4℃, 12,000 × g 离心5 min,洗去残留的DNA酶。9.得到的沉淀,用200ul TE缓冲液重悬线粒体沉淀,加入10ul RNase A。加入200ul线粒体裂解液,轻轻混匀(不可吹打),放置1-2min,再加入150ul蛋白沉淀液,迅速混匀。4℃, 12,000 × g 离心5 min。此步骤可进一步去除核DNA。10.取上清,加入一新的离心管中(如用于酶切分析,可加入此步:选用等体积的酚氯*(代"仿")异戊醇25:24:1抽提一次,再用氯*(代"仿")抽提一次,或者直接用氯*(代"仿")抽提两次,一般来说,此步可去掉一些微量蛋白及糖类,但会造成线粒体DNA的损失,因而用于PCR时可省,并不影响后续实验),加入0.6倍体积的异丙醇(如无异丙醇,可加入2.5倍体积的乙醇沉淀DNA,如离心管太满可分两管)及5-10ul 核酸核酸助沉剂,混匀,-20℃沉淀半小时左右(此步可省),4℃, 12,000 × g 离心10 min。11. 弃上清,再加入1ml 70%乙醇清洗,4℃, 12,000 × g 离心5min。重复用70%乙醇洗一次。12. 弃上清,再次离心1min 吸弃上清,不要碰到管底,开盖凉干约5-105min。13.加入20-30ul TE缓冲液,轻弹管底,37℃水浴5分钟,线粒体DNA溶解。14. 进行DNA电泳检测及-20℃保存,进行下步的实验。四 注意事项:1. 以离心力g计算正确的离心速度,不同的离心机可据此精确计算离心速度。2. 进行Western Blot和2D-胶电泳,可直接在第7步的沉淀中加入上样缓冲液裂解线粒体。3. β-巯基乙醇有毒,请注意通风及防护一般低温度心机都有离心力显示,如果没有,可以用以下公式简单的换算。G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;[rpm] 2即:转速的平方; R为半径,单位为厘米。植物线粒体DNA提取试剂盒报价极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:ARB12892 小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa检测操作说明书 Mouse alpha-fetoprotein,afp ELISA KITN-芴甲氧羰基-N"-甲苯磺酰基-L-精氨酸 Prussian Blue 83792-47-6PY02-370 M17琼脂 100克 ARB10538 人主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)elisa测定使用说明书 Human major Histocompatibility complex Ⅱ,mhcⅡ/hla-Ⅱ ELISA KITHC0067 PCR八连排管(鼓)氮尿苷 HEPE 54-25-1HC0245 Eppendorf 单道可调移液器(整支可消毒系列)BTN81201 酵母电转感受态细胞制备试剂盒 Yeast Electro Competent Cell Preparation KitARB10044 人Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)代做ELISA实验 Human n-terminal procollagen Ⅲ proPeptide,pⅢnp ELISA KITARB10650 人血管生成素2(ANG-2)Elisa定量检测 Human angiopoietin 2,ang-2 ELISA KITARB12403 大鼠组织因子(TF)elisa检测操作说明书 Rat tissue factor,tf ELISA KITCYB167074 兔抗亲合素植物线粒体DNA提取试剂盒报价关键词:百奥莱博,植物线粒体DNA提取试剂盒,XH002·DNA病毒基因组提取试剂盒编号:XH009规格:50T/200T原理简介本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取DNA病毒基因组,不适合于RNA病毒基因组的提取。本试剂盒利用蛋白酶K破开病毒外壳,放出DNA,用玻璃奶吸附达到纯化目的。使用本试剂盒提取的DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。注意事项1.如果病毒含量过低,最后提取的基因组DAN电泳可能无法检测到,但PCR等其他实验还会有结果。2.同一样本,如果想大量提取,可以增加样本量,并且每一步试剂加量,但使用次数会成倍减少。操作步骤1、 取病毒上清液0.5ml,12000rpm离心5min,尽量取上清使用,弃去沉淀。2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混匀,65℃消化10-20min,期间可颠倒离心管混匀数次。3、 向管中加入500ul结合液,充分混匀。4.玻璃奶摇匀。加入20ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。5.室温放置10分钟(如果玻璃奶加量,请适当延长放置时间,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入30-50ul TE缓冲液混匀溶解,65℃水浴5分钟。离心,取上清为所得DNA。8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。植物线粒体DNA提取试剂盒报价关键词:百奥莱博,植物线粒体DNA提取试剂盒,XH002·HRP-羊抗猪IgG编号:XH100规格:100ul/1ml辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体,是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学的各个分支学科中的特异、敏感和安全的免疫化学制剂。我们生产的辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗猪IgG是将辣根过氧化物酶(HRP,来源于SIGMA),经过碘酸钠氧化而标记在抗体羊抗猪IgG(来源于我公司自己纯化的抗体)分子上,而制成HRP-羊抗猪IgG。储存条件:-20℃冻存。浓度:抗体2mg/ml。HRP 1mg/ml应用范围:HRP-羊抗猪IgG主要用于一抗来源于猪多抗(单抗也行)的后续实验。如免疫组化,Western blotting,ELISA等实验。主要性能:免疫组化:1:20~50,DAB显色免疫印迹法:1:100~400,DAB显色,1:1000~5000,ECL发光显色ELISA法:1:500~2000(最高可达一万),用TMB显色·载体两性电解质ph3-9.5编号:XH073规格:12ml别名:两性电解质两性电解质载体(ph3-9.5):Ampholyte solution、Ampholine。性状;近无色至浅黄色透明液体,有粘性,为一中相对分子质量300-1000的人工合成的多氨基多羧酸系列两性化合物的复杂混合物。溶度:为40%的溶液用途:用于生物大分子蛋白质和酶的等电聚焦电泳储存:充氮密封4℃保存。保持期,两年。开启后请尽快用完。
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