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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
380
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
50T/500T
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖北京现货PCR试剂盒(教学用)特价促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京现货PCR试剂盒(教学用)特价促销
品牌:百奥莱博
编号:XH049
规格:50T/500T
产地:国产|进口
常规PCR发展到如今已经是非常成熟,对于大多数的科研人员来说,买TAQ酶和dNTP就可以,而如果为省事,可以直接买PCR MasterMix。而本试剂盒从PCR的原理来让学生学会PCR。本试剂盒带有模板和引物,可以产生500bp的单一条带。
试剂盒组成:
试剂盒组成
50次
500次
储存条件
Taq Polymerase(5U/ul)
50ul
500ul
-20℃
10×PCR Buffer
1ml
5ml
-20℃
MgCl2(25mM)
1ml
5ml
-20℃
模板(1ng/ul)
100ul
1ml
-20℃
上游引物(10mM)
100ul
1ml
-20℃
下游引物(10mM)
100ul
1ml
-20℃
ddH2O(PCR用)
2ml
25ml
-20℃
6×DNA Lodding Buffer
1ml
1ml
-20℃
500bp对照(50ng/ul)
100ul
1ml
-20℃
说明书
1份
1份
RT
保存说明:10×PCR Buffer、MgCl2(25mM)、ddH2O(PCR用)在2-8℃保存一个月对实验无影响,500bp对照、模板和引物在2-8℃保存一周对实验无影响。微量试剂打盖前请离心。
自备试剂:琼脂糖,电泳缓冲液,核酸染料(如EB,goldveiw等)
操作步骤:
按照下面的量加入试剂:可一次配50ul,或者一次配更多的量,如500ul,混匀再分成50ul一管。一般Taq Polymerase最后加入。
加入试剂
加入量总50ul
加入量500ul
ddH2O(PCR用)
37ul
370ul
10×PCR Buffer
5ul
50ul
MgCl2(25mM)
4ul
40ul
模板(1ng/ul)
2ul
20ul
上游引物(10mM)
2ul
20ul
下游引物(10mM)
2ul
20ul
Taq Polymerase(5U/ul)
1ul
10ul
总体积
50ul
500ul
混匀。
按照下面的条件设置反应
温度
时间
循环次数
94℃预变性
3min
1 cycles
94℃变性
30sec
30 cycles
54℃退火
30sec
72℃延伸
500-2000bp/1min
72℃终延伸
5min
1 cycles
反应完降温到25℃
反应完后,取5ul产物,加入1ul 6×DNA Lodding Buffer 混匀电泳检测。可同时在两测跑一个500bp的对照。(1.5%的胶可以得到理想的结果)
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·聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒
编号:XH052
规格:20T/50T
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA*(代"片")段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛
选、连接和转化等实验。配以特制的研磨杵和过滤柱,使你的操作更方便。
操作步骤:(所有离心步骤均可使用台式离心机在室温下离心)
第一次使用前请先在15ml漂洗液中加入60ml无水乙醇。
1、将单一的目的DNA条带从聚丙烯酰胺凝胶中切下(尽量切除多余部分),放入1.5ml离心管中,称取重量,用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入2倍体积的溶胶液吹打混匀(每100mg胶加入200ul溶胶液),75℃水浴30分钟。
2、用1ml的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中(将胶一起吸入,溶液过多时可分次加入)。13,000rpm离心1分钟。将收集管中的滤出液转入新离心管。
3、取六倍体积结合液加入原离心管(每100mg胶加入600ul),清洗管壁后加入过滤柱中(溶液过多时可分次加入),颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀,13,000rpm离心1分钟。将两次收集的滤出液混合。
4、将总滤出液混匀后加入吸附柱中(溶液过多时可分次加入),13,000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。
5、向吸附柱中加入600μl漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),13,000rpm离心30-60秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。
6、向吸附柱中加入600μl漂洗液,13,000rpm离心30-60秒,倒掉废液。
7、将离心吸附柱放回收集管中,13,000rpm离心2分钟,尽量除去漂
洗液。将吸附柱开盖置于室温3-5分钟,彻底晾干,以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
8、将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量65–70℃预热的洗脱缓冲液(20-30μl),室温放置2分钟。13,000rpm离心2分钟收集DNA溶液。
注意:①为了增加回收效率,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,13,000rpm再次离心1分钟。
②洗脱缓冲液体积不应少于20μl,体积过小影响回收效率。
③洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5之间。
9、DNA回收产物直接下一步实验或者-20℃保存。
注意事项:
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
3、本试剂盒对<50bpDNA*(代"片")段回收效率偏低(30%左右),如想回
收,应加大结合液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
4、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越
小,回收率越低。
北京现货PCR试剂盒(教学用)特价促销关键词:PCR,教学用,百奥莱博,XH049,PCR试剂盒(教学用)
·线粒体提取试剂盒
编号:XH058
规格:50T/100T
二,说明
线粒体提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高,可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。
三,操作步骤
1. 样本处理
a. 组织匀浆:称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等,PBS或生理盐水冲洗,洗净血水,滤纸吸干,用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer,0℃冰浴上下研磨组织20次;
b. 培养细胞匀浆:消化细胞,PBS洗涤,800 × g 5~10 min离心收集细胞。计数。每次提取需要5 × 107个细胞,加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞,将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内,0℃冰浴研磨30~40次;
2. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管,4℃,1000× g 离心5 min;
3. 取上清,加入一新的离心管中,4℃,1000× g 再次离心5 min。
4.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 12,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分,可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管,线粒体沉淀在管底;
5. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀,4℃,1000× g 离心5 min;
6.取上清,加入一新的离心管中,4℃, 12,000 × g 离心10 min。弃上清,高纯度的线粒体沉淀在管底;
6. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀,立即使用或-70℃保存。
四 注意事项:
1. 为保证获得完整的线粒体,第一是全程低温操作。第二是快速。第三,在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备线粒体的最关键环节。与组织块相比,培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁,因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2. 以离心力g计算正确的离心速度,不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳,可直接加入上样缓冲液裂解线粒体。
五 储存:四周内使用可4℃储存,长期置-20℃
转速与离心力换算
G=1.11×(10-5)×R×[rpm]2
G为离心力,一般以g(重力加速度)的倍数来表示;
[rpm] 2即:转速的平方; R为半径,单位为厘米。
北京现货PCR试剂盒(教学用)特价促销关键词:PCR,教学用,百奥莱博,XH049,PCR试剂盒(教学用)
BL0898 FITC标记羊抗人纤维蛋白原抗体
13114-27-7 玉米素 Zeatin
L-邻氯苯甘氨酸 Baicalin 141315-50-6
苹果酸钠 Naphthol AS-BI phosphate disodium salt 676-46-0
BL1102 40%丙烯酰胺(19:1)
β-葡萄糖苷酶 Sephadex G-200 9001-22-3
ARB12110 大鼠可溶性E选择素(sE-selectIn)免费代测 Rat soluble e-selectin,se-selectin ELISA KIT
L-甘露糖 2",4"-Dihydroxyacetophenone 10030-80-5
PY04-093 头孢菌素钠 3.2mg/支×10支 每支添加于100ml 改良CCDA琼脂培养基基础中,用于弯曲杆菌的选择性分离培养
BTN131142 鲁米诺 Luminol
9087-70-1 蛋白酶抑制剂 Aprotinin
5-鸟苷三磷酸二钠盐 H-Trp-OMe?HCl 56001-37-7
ARB12917 小鼠白细胞介素1β(IL-1β)血清中含量检测 Mouse interleukin 1β,IL-1β ELISA KIT
L-谷氨酰胺 Indigo carmine 56-85-9
HC0089 离心管(连盖)
双香豆素 N-Acetyl-L-alanine 66-76-2
BL0895 FITC标记兔抗人IgM抗体
β-半乳糖苷酶 Streptavidin 9031-11-2
羟丙基甲基纤维素 Sodium ascorbate 9004-65-3
9003-98-9 (Dnase Ⅰ)DeoxyribonueleaseⅠ
DP314 N96血液基因组提取试剂盒
PY02-232 氯化钠血琼脂基础 250克
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