MEF1-Luc荧光素酶报告基因质粒打折促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

MEF1-Luc荧光素酶报告基因质粒打折促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多MEF1-Luc荧光素酶报告基因质粒等报告基因检测产品请联系我司咨询订购。

名称：MEF1-Luc荧光素酶报告基因质粒打折促销
编号：SY0132
英文名：MEF1 luciferase reporter plasmid
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
MEF1-Luc荧光素酶报告基因质粒（MEF1 luciferase reporter plasmid）是用于检测MEF1(myocyte enhancer factor 1)转录活性水平为目的的报告基因。

MEF1-Luc荧光素酶报告基因质粒主要应用于Myocyte Enhancer Factor 1信号通路、药物研究、相关基因的调控和功能的研究。

pGMMEF1-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个MEF1结合位点，可以高灵敏度地检测MEF1的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得MEF1报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMMEF1-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

欲了解更多MEF1-Luc荧光素酶报告基因质粒打折促销的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:

·线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒(流式分析)
编号：SY0583
英文名称：Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay Kit ( flow cytometry)
规格：100T
线粒体膜通透性转换孔，又称线粒体巨型通道（magachannel），是存在于线粒体内外膜之间的非选择性高导电性通道，由多种蛋白质复合组成。线粒体通透性转换孔 (mPTP)可能参与了细胞死亡过程中线粒体成分的释放。

正常的细胞线粒体内膜可维持正常的线粒体电位梯度以保证细胞呼吸作用及能量供应，随着Ca2+的摄入和释放，一种低电导渗透性转换孔在张开和闭合中来回切换。当细胞发生凋亡时和病理性死亡时，线粒体膜电位转换孔渗透性发生改变，Ca2+的过载，线粒体谷胱甘肽的氧化，活性氧水平的升高，包括后继细胞色素C的释放，线粒体膜电位下降等都会导致线粒体渗透性转换孔的激活。

线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒（流式分析）检测方法是一种相对于仅基于线粒体膜电位分析更直接的检测线粒体通透性转换孔开放的检测方法。其原理是：首先通过被动运输加载Calcein AM，后者是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，能够轻易穿透活细胞膜，被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子 Calcein，从而被滞留在细胞内，使胞质包括线粒体发出强绿色荧光。加入CoCl2后，来自胞质的荧光被CoCl2淬灭，仅留下线粒体内的荧光。作为对照，可将细胞加载Calcein AM和CoCl2的同时，对其用离子霉素处理，从而使细胞加载更多的Ca2+，引起线粒体通透性转换孔的激活从而使线粒体荧光淬灭。

本试剂盒以1ml标记体系计算，可供100次检测。检测最大激发波长494nm，最大发射波长517nm。

产品组份：
Calcein AM———————5×50µg
DMSO——————————250µl
CoCl2(80mM)——————1.2ml
Ionomycin(100µM)————750µl
Cell Stain Buffer———2×250ml

储存条件：-20℃避光干燥，避免反复冻融，有效期至少6个月


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·谷胱甘肽琼脂糖树脂(用于GST标签蛋白纯化)
编号：SY0395
英文名称：Glutathione Agarose Resin
规格：10ml
Glutathione Agarose Resin是一种GST标签蛋白纯化树脂，结构上以4%琼脂糖凝胶为基质，通过12个原子的间隔臂，用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成。该设计使树脂的纯化效率得到了较大提高，使其每毫升基质可承载＞20mg GST融合蛋白。

此外，本品特异性好，性价比高，可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。

基质（Matrix）：4%琼脂糖微球
配体（Ligand）：通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽
孔径（Bead size）：45-165µm
载量（Capacity）：＞20mg GST protein/ml 基质（40kDa）
最大压力（PressureMax）：0.1 MPa, 1bar
pH稳定范围：3-12
储存缓冲液：20%乙醇
储存条件：4℃，有效期2年

需准备试剂
所用水和Buffer在使用前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤除菌。
结合/洗杂缓冲液：PBS，pH7.4(140mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH7.4)
洗脱缓冲液：50mM Tris-HCl, 10mM 还原型谷胱甘肽，pH 8.0
【注】：结合/洗杂缓冲液或者洗脱缓冲液中可加入1-10mM DTT。

使用方法
【注】样品在上样前最好用0.22µm或0.45µm滤膜过滤，减少杂质以防阻塞柱子。

1样品纯化
1）装柱：将Glutathione Agarose Resin装入合适的层析柱，注意避免产生气泡。
2）平衡：用5倍柱体积的结合Buffer平衡柱子，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
3）上样：Resin平衡后，加入蛋白样品，使其与Resin充分接触，提高目的蛋白回收率，收集流出液。
4）洗杂：用10-15倍柱体积的洗杂缓冲液进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
5）洗脱：使用5-10倍柱体积的洗脱缓冲液，收集洗脱液，即目的蛋白溶液。
6）清洗与保存：依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料，最后用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%乙醇中，置于4℃保存，防止填料被细菌污染。

2 SDS-PAGE检测

将纯化过程中得到的样品（包括原始样品、流出组分、洗杂及洗脱组分等）利用SDS-PAGE进行检测，判定其纯化效果。

3 填料清洗

GST标签蛋白纯化产品可以重复使用而无需再生，但随着非特异结合蛋白的增多和蛋白的聚集，会造成流速和结合载量性能下降，此时需对填料进行清洗。
1）去除一些沉淀或变形物质
用2倍柱体积的6M 盐酸胍溶液进行清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。
2）去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或2倍柱体积1% Triton X-100清洗，然后立即用5倍柱体积的PBS，pH7.4清洗。

注意事项
1）请勿冷冻保存本产品。
2） Glutathione Agarose Resin使用前一定要充分颠倒若干次，使琼脂糖珠混合均匀。
3）所有操作过程中，样本需要在4℃或冰上操作。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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