耐热逆转录酶II品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售，产品线涵盖耐热逆转录酶II品牌在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：耐热逆转录酶II品牌
英文名：Reverse Transcriptase II
品牌：百奥莱博
编号：SY0294
产地：国产|进口
Reverse Transcriptase（第二代耐热逆转录酶）是Reverse Transcriptase（第一代耐热逆转录）的升级产品，是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上通过体外分子进化技术获得的全新耐热逆转录酶。与上一代相比，进一步大幅提高了热稳定性，50℃下半衰期超过240min，并长时间耐受55℃高温且保持稳定，非常适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。此外，增加了多个突变位点，进一步增强了模板亲和力和行进性，大幅提升全长cDNA的合成能力，可获得长达20 kb的cDNA。另外，对于常见的逆转录抑制物具有更高的耐受度，非常适合于植物组织RNA的逆转录反应。

活性定义：以Poly(rA) Oligo(dT)为模板/引物，在37℃，10min内，掺入1 nmol的dTTP为酸不性溶物质所需要酶量定义为1个活性单位（U）。

质量控制
核酸外切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在37 ºC下孵育1h，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37 ºC下孵育1h，DNA的电泳谱带不发生变化。
RNase残留检测：200 U本品和1 μg小鼠肝脏总RNA在37 ºC下孵育1h，RNA电泳谱带不发生变化。
功能检测1：逆转录体系中加入200 U本品，以100 pg Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)23为引物，50 ºC反应30min。取10% cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的550 bp条带。
功能检测2：逆转录体系中加入200 U本品，以500 ng Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)23为引物，55 ºC反应45min。取10% cDNA产物进行PCR扩增Polε基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的4.8 kb (GC-rich)条带。
功能检测3：逆转录体系中加入200 U本品，以1 pg-1 μg Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)23VN和Random Hexamers为引物，测试qRT-PCR 性能。以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线，R2>0.990，斜率在-3.20到-3.60之间。

准备工作
1. 防止RNase污染：请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free。
2. 引物选择：
2.1 后续实验为PCR
a, 如果模板为真核生物来源，一般情况下首选Oligo dT18，与真核生物mRNA的3’Poly A尾配对，可获得最高产量的全长cDNA。
b, 基因特异性引物 (GSP)的特异性最高。但有些情况下，用于PCR反应的GSP无法有效引导第一链cDNA合成。这时，可改用Oligo dT18或Random hexamers重新进行逆转录。
c, Random hexamers特异性最低，所有RNA，包括mRNA, rRNA, tRNA均可以作为Random hexamers的模板。当目标区域具有复杂二级结构或GC含量较高，或者模板为原核生物来源，使用Oligo dT18或基因特异性引物 (GSP)无法有效引导cDNA合成时，可使用Random hexamers为引物。
2.2 后续实验为qPCR
a, 将Oligo dT18与Random hexamers混合使用，可使mRNA的各个区域均能以相同效率引发cDNA合成，有助于提高定量结果的重复性。

我公司的耐热逆转录酶II品牌，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销售下列产品：

·牛血清白蛋白(无蛋白酶)
编号：SY0455
英文名称：BSA, Protease Free
规格：25g
本品为无蛋白酶的牛血清白蛋白（BSA, Protease Free），经检测无蛋白酶残留，且其他酶活性也极其低。非常适用于对蛋白酶敏感性高的重组蛋白生产，更适合用于RIA/ELISA实验封闭剂以及抗体稀释液。

牛血清白蛋白，英文名称为Bovine Serum Albumin，也称Bovine albumin，或Cohn Fraction V，简称BSA。BSA有着极其广泛的实验室应用，在免疫实验中常用作封闭剂，包括ELISA、WB（Western Blot）。作为载体蛋白，将其交联于半抗原和其他弱抗原可以使它们在抗体生产中具有更强的免疫原性。在限制性内切酶消化反应中，BSA常常被用作一些酶的反应稳定剂，并且能防止它粘附到管壁和枪头上。BSA也常用于生物制药的生产过程或者作为营养物用于细胞和微生物培养。除此之外，还作为蛋白定量检测的标准品使用。我们提供的BSA产品，使用优质牛血浆，利用热休克法（Heat Shock）法制备而成。

CAS：9048-46-8
分子量：66 kDa
外观：米色（灰白色）粉末
湿度：：≤5.0%
灰分（Ash）：≤2.0%
pH值（pH Value）：6.8-7.2
白蛋白（Albumin）：≥ 98%（电泳）
总蛋白（Protein）：≥96%
重金属（Heavy Metals）：≤10 ppm
蛋白酶（Protease）：未检测到
溶解度：易溶于水
储存条件：4℃密封，有效期至少5年


耐热逆转录酶II品牌关键词：Reverse Transcriptase II,SY0294,耐热逆转录酶II


·4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液，pH6.8
编号：SY0356
英文名称：4×Tris-HCl-SDS Stacking Gel Buffer, pH6.8
规格：250ml
4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中含有0.5 M Tris base, 0.4% SDS，用HCl调至pH6.8，25 ℃。用于SDS-PAGE上层浓缩胶的配制。配制时无需再加10%SDS。

本品为4倍浓缩液，使用时只需稀释成1×工作液即可。

Tris英文名称：Tris base；2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol
分子式：C4H11NO3
分子量：121.14。
储存条件：室温。

·HRP标记小鼠抗His-tag(C末端特异性)单克隆抗体
编号：SY0645
英文名称：HRP-conjugated His-tag (C-terminal Specific), Mouse mAb
规格：100μl(＞200次)
本品为HRP标记小鼠抗His-tag(C末端特异性)单克隆抗体，小鼠抗His标签(C末端特异性)单克隆抗体。推荐稀释比例：WB（1:4000～16000）

His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His- His-His)组成的短肽，可与多种蛋白形成融合蛋白，基于组氨酸的咪唑环与金属离子（如镍离子）起化学作用而生成螯合的原理，可以利用His-Tag标签纯化His融合蛋白。由于分子量较小，并且较容易分离和纯化，His融合标签与其他标签相比有很多明显优势，是目前融合标签中使用最为广泛的一种。

本品为HRP标记的小鼠抗His-tag（C末端特异性）单克隆抗体，仅可识别位于融合蛋白C端的His-tag。该抗体具有高灵敏度，高特异性和高亲和力。

产品类型：小鼠单抗（mouse mAb IgG1）
反应性：His-tag位于C端的重组蛋白
宿主：Mouse
应用：WB
克隆号（Clone NO.）：9F2
免疫原：偶联KLH的6×His多肽
缓冲液：含50%甘油的PBS，pH7.3
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。



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·Anti-V5标签亲和纯化凝胶
编号：SY0434
英文名称：Anti-V5 Affinity Gel
规格：1ml
Anti-V5 Affinity Gel（Anit-V5亲和纯化凝胶）由高质量的鼠源 IgG2b单克隆抗体与sepharose 4B gel 通过供价偶联制备，本产品具有较高的V5标签融合蛋白加载容量（至少为0.6mg protein/mL凝胶），杂蛋白非特异结合少，可用于带有V5标签的融合蛋白免疫沉淀（IP）和纯化。推荐使用量：每500μl蛋白粗体液需使用5μl凝胶。

亚型：Mouse IgG2b
纯化方法：Protein A
浓度：7.5g抗体/L凝胶
应用：蛋白纯化，免疫沉淀（IP）
蛋白结合量（Protein）：≥1.1 mg蛋白/mL凝胶
储存缓冲液：10 mM Na3PO4, 150 mM NaCl, 50% 甘油, pH 7.4，含有0.02%（w/v）叠氮钠
储存条件：-20℃，有效期1年

·大鼠纤连蛋白
编号：SY0522
英文名称：Rat Fibronectin
规格：0.5mg
本品为大鼠纤连蛋白，以冻干粉形式供货，产品稳定性高，易运输。经验证HBsAg阴性，HIV和HCV抗体检测阴性。

细胞纤连蛋白（fibronectin，FN）是一种细胞外糖蛋白，分别以可溶形式存在于体液中，或以不可溶形式存在于细胞外基质中。作为主要的细胞粘附分子之一，FN在许多重要的生理过程中起着关键性作用，如胚胎生成，伤口愈合，止血和血栓形成。纤连蛋白表达的改变，降解以及组合与大量的病理发生密切相关，包括癌症和纤维化。

FN一般以二聚体形式分泌，各个单体的分子量为220-250kDa。主要由成纤维细胞、内皮细胞、软骨细胞、神经胶质细胞和肌细胞等合成，并分布在周围。器官移植会激发一系列的免疫级联反应，FN在T细胞活化过程表现为激活因子。所有FN由同一个基因编码产生，因转录后的mRNA经组织特异性的不同切割方式生成不同的翻译产物。FN上的多个结构域能与胶原、纤维蛋白、肝素和特异性细胞膜受体结合。其中广为人知的结合域是Arg-Gly-Asp 序列(RGD)，为整合素识别后调控细胞粘附。FN参与体内众多生理作用和功能，如各种细胞间的吸附和迁移，细胞骨架组装，酪氨酸磷酸化和肿瘤转移等。

纤连蛋白作为细胞培养基质，功能在于促进细胞生长，提高细胞贴壁率，增强细胞代谢水平，缩短细胞生长时间；杂交瘤技术中提高细胞融合率等。

来源：大鼠血浆
CAS：86088-83-7
分子量：约220 KDa
外观：冻干粉
缓冲液：Lyophilized with 10 mg Tris buffer salts and 20 mg NaCl at pH 7.5.
纯度：> 98% by SDS-PAGE
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期1年

我公司强烈推荐核酸扩增(PCR)系列产品，热情期待您的咨询选购耐热逆转录酶II品牌。