小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒销售

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售，产品线涵盖小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒销售在内的细胞生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒销售
品牌：百奥莱博
英文名：Immunohischemistry Kit for Mouse Primary Antibody
规格：150T
编号：SY0769
本试剂盒可用于检测以小鼠单克隆或多克隆抗体为一抗的免疫组化实验，检测原理基于高特异性高亲和力的链霉亲和素-生物素结合：已固定或培养细胞的抗原与一抗形成抗原抗体复合物，生物素化二抗特异性结合上述复合物，经辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素特异性识别生物素（即抗原所在位置），最后经辣根过氧化物酶底物显色即可检测相应抗原。

本品可适用于多种类型样本，如石蜡包埋切片、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本等。

产品组份：

封闭液————————————7.5ml
生物素标记抗小鼠二抗————7.5ml
HRP 标记链霉亲和素————7.5ml
20×DAB底物缓冲液————400µl
20×H2O2浓缩液————400µl
20×DAB浓缩液————400µl

使用方法

1 样品准备
染色前用PBS浸泡组织或细胞涂片10min。石蜡切片于室温下用二甲苯常规脱蜡、入水、抗原修复。
【注】：从此步骤起，严禁标本或组织切片干燥。

2 染色（以石蜡切片为例）
1）将处理好的石蜡切片放入3% H2O2-甲醇溶液中浸泡10min，以消除内源性过氧化氢酶的作用。
2）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
3）封闭：加一滴封闭液于组织切片上（需完全覆盖待检组织）孵育10min。
4）倒掉或吸干液体（不要冲洗）。
5）一抗：每张切片加2滴（100μl）或适量一抗（需完全覆盖待检组织），湿盒内孵育30-60min。
6）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
7）二抗：每张切片加一滴生物素标记抗小鼠二抗（需完全覆盖待检组织），孵育10min。
8）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
9）酶孵育：每张切片加一滴HRP标记链霉亲和素（需完全覆盖待检组织），孵育10分钟。
10）清洗：PBS清洗3次，2 min/次。
11）制备DAB显色液。
按照【20×DAB浓缩液：20×H2O2浓缩液：20×DAB底物缓冲液：水=1:1:1:20】的比例进行配制显色液，以1张切片为例，分别吸取上述3种溶液各2.5µl溶于50µl去离子水中，充分混匀即可。
【注】：
① DAB显色液需现配现用，避光放置，且在30min内使用。
② 可根据需要一次染多张切片，各种试剂量按照上述比例放大即可。
12）显色：向切片上滴加一滴上述DAB显色液，室温显色2-5min（此步可在显微镜下控制显色程度）。
13）自来水充分冲洗。
14）用合适复染剂复染，盐酸酒精分化。
15）继续后续脱水、透明、封片、镜检。

3结果判定：阳性结果处显处染棕黄或棕褐色。

储存条件：4℃，勿冷冻，有效期一年。

关于小鼠免疫组化(IHC)检测试剂盒销售的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·兔抗GFP-tag多克隆抗体
编号：SY0661
英文名称：GFP-tag, Rabbit pAb
规格：20μl(＞40次)
本品为兔抗GFP-tag多克隆抗体，兔抗GFP标签多克隆抗体。推荐稀释比例：WB（1:2000～10000），IP（1:2000～20000），IF（1:10～100）。

GFP(Green Fluorescent Protein)最早是从一种生活在北太平洋寒冷水域的水母(Aequoria victoria) 体内发现的蛋白，该蛋白在蓝色波长范围的光激发下能发出绿色的荧光，其最大和次大的激发波长是395 nm和470 nm；最大发射波长是509 nm，在540 nm处有一肩峰。

由于GFP具有荧光性质稳定，对细胞无毒害，表达具有光谱性等一系列的优点，常作为报告基因，融合标签和细胞标记物等，应用于分子和细胞生物学领域。

产品类型：兔多克隆抗体（Rabbit Polyclonal, pAb）IgG
反应性：重组蛋白
宿主：Rabbit
应用：ELISA, IF, WB, IP
抗原分子量：26kDa
储存缓冲液：含0.1%叠氮钠、50%甘油的PBS，pH7.3
纯化方式：抗原亲和纯化
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

·细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒
编号：SY0326
英文名称：Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
规格：50T
细胞核蛋白、细胞浆蛋白在细胞研究和蛋白质组学中具有重要意义，因此在体外研究中需要将其从细胞或组织中分离。本试剂盒提供了一种较为简单方便，高效的蛋白抽提方法，其原理是：通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B，在低渗透压条件下，使细胞充分膨胀，然后破坏细胞膜，释放出细胞浆蛋白，然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂C抽提得到细胞核蛋白。

本试剂盒1次可对2×106个细胞和30-50mg组织样品进行抽提，按照该使用量，SY0326可抽提50个样品。

产品组份：
胞浆蛋白抽提试剂A————10ml
胞浆蛋白抽提试剂B————0.5ml
胞核蛋白抽提试剂————2.5ml

储存条件：-20℃，有效期一年。

使用方法
将试剂盒各组分溶解后立即放置在冰上，混匀。取适量的胞浆蛋白抽提试剂A（以下统称：试剂A）和胞核蛋白抽提试剂（以下统称：试剂C）备用，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。

1 细胞样品蛋白的抽提
1）细胞处理
对于贴壁细胞：PBS清洗细胞1次，EDTA溶液消化细胞或用细胞刮子刮下细胞，并用移液器吹打下细胞。离心收集细胞，尽量吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
【注】：尽量避免用胰酶消化细胞，以免胰酶降解抽提的目的蛋白。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，PBS清洗细胞1次，收集细胞，尽量吸尽上清，留细胞沉淀备用。
2） 每20µl细胞沉淀加入200µl含PMSF的试剂A。
【注】：对于2×106个Hela细胞，其细胞沉淀的体积大约为20µl或40mg。
3） 最高速剧烈涡旋5s，完全悬浮分散细胞沉淀。
【注】：如果细胞沉淀没有完全悬浮并分散开，可以适当延长旋涡震荡的时间。
4） 冰浴10-15min。
5） 加入胞浆蛋白抽提试剂B（以下统称：试剂B） 10µl。最高速剧烈涡旋5s，冰浴1min。
6） 最高速剧涡旋5s，4℃12,000-16,000g离心5min。
7） 立即吸取上清至一预冷的塑料管中，上清即为抽提得到的细胞浆蛋白。可以立即使用，也可以冻存备用。
【注】：此步千万不要触及沉淀，可以在沉淀上方保留极小体积的上清，以免吸到沉淀。
8） 对于沉淀，完全吸尽残余上清，加入50µl含PMSF的试剂C。
【注】：此步需完全吸尽上清，否则会带来细胞浆蛋白的污染。
9） 最高速剧烈涡旋15-30s，把沉淀完全悬浮并分散开。然后放回冰浴中，每隔1-2min再高速剧烈涡旋15-30s，共30min。10）4℃ 12,000-16,000g离心10min。
11）立即吸取上清至一预冷的塑料管中，即为抽提得到的细胞核蛋白。可以立即使用，也可以-70℃冻存备用。

2 组织样品的抽提
1） 将组织切成非常细小的碎片。根据后续使用量按照20:1的比例混合试剂A和B，并加入PMSF至最终浓度为1mM，混匀即可配制成组织匀浆液。按照每60mg组织加入200µl组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液，并在玻璃匀浆器内充分匀浆。
【注】：匀浆需在冰浴或4℃进行。
2） 匀浆后将匀浆液转移至塑料离心管内，冰浴放置15min。
3） 4℃ 1,500g离心5min。把上清转移至一预冷的塑料管中，上清含部分细胞浆蛋白。
【注】：吸上清时千万不要触及沉淀。
4） 对于上述收集得到的沉淀，已经充分匀浆，但很多细胞仍没有破碎。接下来请参照【细胞样品蛋白抽提】的步骤2）开始操作，即把沉淀当做已经离心收集好的细胞沉淀操作，即可得到细胞浆蛋白和细胞核蛋白。抽提得到的细胞浆蛋白可以和步骤【组织样品抽提】中步骤3）抽提得到的细胞浆蛋白合并备用。


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·多聚L-赖氨酸(分子量，30,000-70,000)
编号：SY0521
英文名称：Poly-L-lysine, Mw 30,000-70,000
规格：25mg
本品为多聚-L-赖氨酸（Poly-L-lysine），分子量为30,000-70,000，适用于细胞培养、结合甲氨蝶呤增加药物传输、细胞微胶囊技术、微阵列载玻片包被以及染色体制备等实验。本品以氢溴酸（HBr）的形式提供，约1个赖氨酸残基结合1分子的氢溴酸，使其以稳定的结晶固体形式提供，并具有更强的水溶性。用作细胞培养基质，推荐使用量为：对于25cm2的培养板需要0.1mg/ml的聚赖氨酸溶液约0.5ml-1.0ml。

多聚赖氨酸（poly-lysine）是一种带正电荷的氨基酸聚合物，能够结合于DNA，红细胞膜或任何带负电荷蛋白，是一种非特异性的细胞粘附因子，促进细胞吸附到固相基质上。作用机理在于其可增强细胞膜表面的负电荷离子和固相基质表面（如细胞培养皿，载玻片等）的静电相互作用。当吸附到培养表面后，多聚赖氨酸提高用于细胞结合的阳离子结合位点数。多聚赖氨酸分子量的大小与粘度相关，即分子量较低，粘度较低；分子量较高，粘度较高，提供的粘附位点也较多。分子量＞30,000的聚赖氨酸适用于促进细胞粘附到固体基质。

多聚赖氨酸（poly-lysine）有两种常见亚型，D-和L-型。由于多聚赖氨酸是细胞结合的非特异性粘附因子，因此两种亚型都可用作包被固体基质，在细胞培养中都可促进细胞的贴壁生长。

中文别名：多聚赖氨酸溶液（L型）
英文别名：Poly-L-lysine Solution; PLL; Poly-L-lysine hydrobromide Solution
CAS：25988-63-0
分子式：L-Lys-(L-Lys)n-L-Lys·xHBr
分子量：30,000-70,000
外观：白色至类白色粉末
溶解性：溶于水（50mg/ml）
储存条件：-20℃，有效期4年
结构式



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·牛胰岛素
编号：SY0459
英文名称：Insulin (From Bovine)
规格：25mg
我司提供的牛胰岛素是通过多次硫酸铵和等电点沉淀的方法从牛胰腺的乙醇/磷酸提取物中纯化获得，常用作细胞培养的辅助成分，常见使用浓度为1-10 μg/ml。

胰岛素是胰腺中胰岛β细胞分泌的一种双链形式（α,β）的多肽激素，由51个氨基酸组成，分子量约5800 Da。两条链间通过二对二硫键连接，而α链自身还含有一对二硫键。胰岛素是目前已知的机体内唯一能降低血糖的蛋白激素，不仅负责调控细胞对葡萄糖、氨基酸和脂肪酸的摄入，利用和储存，而且抑制糖原，蛋白质和脂肪的降解发生。

不同物种胰岛素功能大体相同，只是氨基酸组成上的差异。人胰岛素结构见下：



牛胰岛素不同于人胰岛素的氨基酸位点是：α链中的第八个氨基酸（α8）用丙氨酸（A）替代苏氨酸（T），第十个氨基酸（α10）用缬氨酸（V）替代异亮氨酸（I）。β链中C末端用丙氨酸（A）替代苏氨酸（T）。

CAS：11070-73-8
纯度：≥95% (HPLC)
分子式：C254H377N65O75S6
分子量：5733.5
外观：白色或浅黄色粉末
活性（potency）：≥27 USP units/mg
锌含量（Zinc Amount ）：~0.5%（若实验要求去除锌离子，可将胰岛素溶解在稀醋酸内，加入过量EDTA螯合锌离子，然后等电点沉淀纯化胰岛素）
溶解性：不溶于水，溶于稀醋酸或稀盐酸（pH 2-3）
等电点（pI）：pl = 5.3 （天然蛋白）
沉降系数（S20,w）
（Sedimentation Coefficient）：1.95 x 10-13
扩散系数（D20,w）
（Diffusion Coefficient）：7.30 x 10-7
EM(278nm)：6080（33 mM phosphate，pH 7.0）
E1%(278nm)：10.6（33 mM phosphate，pH 7.0）
序列：A-Chain: G-I-V-E-Q-C-C-A-S-V-C-S-L-Y-Q-L-E-N-Y-C-N
B-Chain:F-V-N-Q-H-L-C-G-S-H-L-V-E-A-L-Y-L-V-C-G-E-R-G-F-F-Y-T-P-K-A
储存条件：-20℃干燥

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