北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fl

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名称：北京细胞凋亡检测试剂盒(Annexin V-Alexa Fluor 488/PI)厂家价格
编号：SY0474
品牌：百奥莱博
规格：20 rxn
产地：国产|进口
Annexin V-Alexa Fluor488/PI细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-Alexa Fluor488/PI Apoptosis Detection Kit）是用Alexa Fluor488标记了的Annexin V作为探针，来检测细胞早期凋亡的发生，可用流式细胞仪或其他荧光检测设备进行检测。

其检测原理为：在正常的活细胞中，磷脂酰丝氨酸（phosphotidylserine，PS）位于细胞膜的内侧，但在早期凋亡的细胞中，PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面，暴露在细胞外环境中。Annexin-Ⅴ（膜联蛋白-V）是一种分子量为35-36KD的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白，能与PS高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。

另外，本试剂盒中还提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞。PI是一种核酸染料，它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞的完整的细胞膜，但可以透过凋亡晚期和坏死细胞的细胞膜而使细胞核染红。因此，将Annexin V与PI联合使用时，PI 则被排除在活细胞（Annexin V-/PI-）和早期凋亡细胞（Annexin V+/PI-）之外，而晚期凋亡细胞和坏死细胞同时被Alexa Fluor488 和PI 结合染色呈现双阳性（Annexin V+/PI+）。

试剂盒组份：
Annexin V-Alexa Fluor488————————100 μl
PI Staining Solution (20 μg/ml)————200 μl
4×Binding Buffer————————————4 ml

注意事项
1) 由于细胞凋亡是一个快速的过程，建议样品在染色后1小时之内进行分析。
2) 对于贴壁细胞，消化是一个关键步骤。贴壁细胞诱导细胞凋亡时如有漂浮细胞，需收集漂浮细胞和贴壁细胞后合并染色。处理贴壁细胞时要小心操作，尽量避免人为的损伤细胞。胰酶消化时间过短，细胞需要用力吹打才能脱落，容易造成细胞膜的损伤，PI摄入过多；消化时间过长，细胞膜同样易造成损伤，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-Alexa Fluor488的结合。消化时将胰酶铺满孔板底后，轻摇时胰酶与细胞充分接触，然后倒掉大部分胰酶，利用剩余的少量胰酶再消化一段时间，待细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状即可终止。在消化液中尽量不用EDTA，EDTA会影响Annexin V与PS的结合。
3) 如果样品来源于血液，请务必除去血液中的血小板。因为血小板含有PS，能与Annexin V结合，从而干扰实验结果。可以使用含有EDTA的缓冲剂并在200 g离心洗去血小板。
4) 试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
5) Annexin V-Alexa Fluor488和PI是光敏物质，在操作时请注意避光。

储存条件：4℃，有效期一年。

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·高分辨率琼脂糖(PCR级)
编号：SY0256
英文名称：High Sieving Agarose
规格：5g
琼脂糖（Agarose）是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，常用于通过凝胶电泳或者印迹法（如Northern或Southern）来进行日常核酸分析，也适用于蛋白应用，如辐射状免疫扩散（RID）实验。

本品为PCR级高分辨率琼脂糖，对PCR产物、小片段DNA具有较高的分辨率，适宜分离20bp-800bp的DNA*(代"片")段，其分离效果可与聚丙烯酰胺相媲美。此外，还具有如下特点：
1）易溶解，胶液更清澈，可以配制高达5%的凝胶；
2）很低的背景；
3）品质稳定等。

琼脂糖的基本参数，包括：

1） 硫酸盐含量（sulfate content）——纯度指标，因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团；
2） 凝胶强度（gel strength）——施加于凝胶使之断裂的外力；
3） 胶凝点（Gel point）——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中，琼脂糖溶液具有滞后性，因此，胶凝点不等同于胶熔点。
4） 电渗（EEO）——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移，但是解离的阳离子就会朝负极迁移，从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动，则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。

产品性质

CAS：	39346-81-1
外观（Appearance）	白色粉末
凝胶强度（Gel Strength）	≥750g/cm2（1.5% gel）
凝胶温度（Gel Point）	≤33℃（1.5% gel）
融胶温度（Melting Point）	≤70℃（1.5% gel）
电渗值（EEO, -mr）	≤0.10
外观（Appearance）	无色清澈胶液
硫酸盐（Sulfate, %）	≤0.10%
水分：	≤10%
灰分（Ash Content）	≤0.5%
DNA酶（DNase）	Not detected
RNA酶（RNase）	Not detected
蛋白酶（Protease）	Not detected
核酸内切酶（Endonuclease）	Not detected

使用方法

1）配制适量电泳及制胶用的缓冲液（根据电泳需要，配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液），倒入合适三角瓶中。【注意】：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2）根据制胶量及凝胶浓度，加入准确称量的琼脂糖粉（总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量）。
3）在微波炉中加热溶解琼脂糖，设置中火加热至沸腾，保持胶液沸腾约 30s，戴上防热手套，移开三角锥瓶，小心摇动三角锥瓶，重悬未溶解颗粒，再次用高火加热1分钟（或加热直至琼脂糖完全溶解）。请戴上防热手套，小心摇动三角锥瓶，使琼脂糖胶液充分均匀。
【注意】：必须保证琼脂糖充分完全溶解，此时琼脂糖胶液清澈，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4）使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5µg/ml，并充分混匀。
【注意】：溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时，请戴用手套。建议使用我司提供的EB无毒替代品（YeaRed 核酸染料，Cat# 10202），使用时仅需用制胶缓冲液稀释至1×工作液即可。
5）将琼脂糖溶液倒入制胶模具中，在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5mm之间。
6）在室温下使胶凝固（大约30min-1h），然后放置于电泳槽中进行电泳。
【注意】：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存，一般可保存 2～5天。

琼脂糖浓度与DNA分离范围

线性DNA*(代"片")段大小（bp）	20-250	50-500	100-1200	500-2000
琼脂糖浓度（%）	5.0	4.0	3.0	2.0

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·6×His Tag多肽
编号：SY0426
英文名称：6×His Tag Peptide
规格：5mg
6×His Tag多肽（6×His Tag Peptide）是由6个组氨酸残基组成的多肽，组氨酸残基侧链对镍离子具有高选择性亲和力。在免疫分析实验中，6×His Tag多肽与6×His融合蛋白竞争性结合anti-6×His抗体。用于洗脱6×His-tag融合蛋白时，6×His Tag多肽的推荐工作浓度是100-400μg/ml。

多肽序列（Amino acid sequence）：H-His-His-His-His-His-His-OH
分子式：C36H44N18O7
分子量：840.85
外观：白色粉末
纯度：＞99%
溶解性：溶于水或1%醋酸
储存条件：-20℃，有效期1年

·40%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺，19:1
编号：SY0339
英文名称：40% Acryl/Bis Solution, 19:1
规格：500ml
Acryl-Bis常用于配制聚丙烯酰胺凝胶（PAGE胶），包括SDS-PAGE胶等，可以用于蛋白或核酸的分离。聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺（Acrylamide，简称Acryl）和交联剂甲叉双丙烯酰胺（N，N’-methylene bisacrylamide，简称Bis）在由TEMED（N,N,N’,N’-四甲基乙二胺）催化过硫氨酸还原产生的自由基的存在下，引发聚合反应，形成不带电荷、且具有分子筛性质的网状结构。凝胶的孔径由两个参数决定，分别是单体总浓度（%T, w/v）和交联剂比重（%C）。

产品性质


通过改变这两个参数，可优化孔径确保得到最佳的分离效果和最佳分辨率。%T决定凝胶的相对孔径大小，%T越高，平均孔径越小。
本品为含40%（w/v）Acryl/Bis的水溶液，两者之间的比例为19:1，更适合DNA测序和核酸分离。

储存条件：4℃，避光

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