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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 保质期:
一年
- 英文名:
Alkaline Gel Buffer, 10×
- 库存:
大量
- 供应商:
康朗生物
- 规格:
250mL
碱性胶电泳液,10×
英文名:Alkaline Gel Buffer, 10×编号:KL100816
规格:250mL
产品简介:
本产品为10×的琼脂糖碱性电泳液,专门用于琼脂糖碱性变性电泳,后者主要用于分析抗核酸酶S1的DNA-RNA杂交分子DNA的大小、分析cDNA链大小、检测反转录酶合成第一条和第二条cDNA链的大小、检测分子克隆中酶的缺口活性、标定DNA缺口平移核素标记实验中试剂的用量等。
运输及保存:
常温,有效期一年。
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文献和实验钠,5mmol/L DETA(pH8.0)4)甲醛, 甲酰胺3 仪器: 电泳装置,紫外透射观测仪二、实验程序1 甲醛变性的琼脂糖(Agarose) 凝胶的配制在250mL的锥形瓶中准确称量2g Agarose (Sigama),再加20mL 10×TAE Buffer,144mLDEPC处理过的双蒸水,微波炉中化胶,待冷却至50-60℃加EB至终浓度≤0.5μg/mL。在通风橱中加入36 mL甲醛,放置一段时间以减少甲醛蒸汽。2 RNA的甲醛变性电泳1) 样品制备,RNA总量10μg,5×甲醛凝胶
操作篇:western blot 之 SDS-PAGE 电泳
电泳篇开始 一、清洗玻璃板 一只手扣紧玻璃板,另一只手蘸点洗衣粉轻轻擦洗。两面都擦洗过后用自来水冲,再用蒸馏水冲洗干净后立在筐里晾干。 二、灌胶与上样 1. 玻璃板对齐后放入夹中卡紧。然后垂直卡在架子上准备灌胶。 注意:可以用 1% 琼脂糖在垂直电泳槽的左. 右和下部封边,五分钟后重复一次,这样可以保证基本不漏胶。 2. 按前面方法配 10% 分离胶,加入 TEMED 后立即摇匀即可灌胶。灌胶时,可用 10 ml 枪吸取 5 ml 胶沿玻璃
静置约 1 h,直至凝胶溶液完全聚合凝固,小心拔出梳子,准备上样。 上样 向电泳槽中加入电泳缓冲液,要求两块玻璃内侧电泳液高于上样孔,外侧电泳槽内电泳液浸没凝胶底部,玻璃板内侧液面高于外侧,根据测得浓度计算的样本上样量点样(已处理好的样品,蛋白预染 Marker),保证每孔总蛋白量在 30-50 μg,确保总上样量体系小于 30 μL,注意上样时间尽量短,避免样品扩散。 电泳 上样后,盖好电泳槽的盖子,注意正负极,并选择适当的电压进行电泳。通常在不连续的系统中,上层浓缩胶的电泳电压(建议
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