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- KALANG
- 中国大陆
- KL0255
- 2025年07月14日
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冷藏
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长期
- 英文名：
NuSieve3:1Agarose
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大量
- 供应商：
康朗生物
- 规格：
5g
3:1琼脂糖
编号：KL0255英文名：NuSieve3:1Agarose
规格：5g
琼脂糖（Agarose）是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体，提取自琼脂或者含琼脂的海藻，结构上是一种线性聚合物，由β-D-吡喃半乳糖（1-4）连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂，常用于通过凝胶电泳或者印迹法（如Northern或Southern）来进行日常核酸分析，也适用于蛋白应用，如辐射状免疫扩散（RID）实验。
本品为NuSieve3:1 琼脂糖，与常规琼脂糖相比，对PCR产物，小片段DNA（1000bp以下）具有很高的分辨率。此外，还具有如下特点：
1）易溶解，胶液更清澈，可以配制高达5%的凝胶；
2）很低的背景；
3）品质稳定。
琼脂糖的基本参数，包括：
1）硫酸盐含量（sulfate content）——纯度指标，因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团；
2）凝胶强度（gel strength）——施加于凝胶使之断裂的外力；
3）胶凝点（Gel point）——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中，琼脂糖溶液具有滞后性，因此，胶凝点不等同于胶熔点。
4）电渗（EEO）——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移，但是解离的阳离子就会朝负极迁移，从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动，则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。
产品性质：
外观：白色粉末
凝胶强度：≥650g/cm2（1.5% gel）
凝胶温度：≤36℃（1.5% gel）
融胶温度：≤80℃（1.5% gel）
电渗值：≤0.10
外观：无色清澈胶液
硫酸盐：≤0.10%
水分：≤10%
灰分：≤0.5%
使用方法
1）配制适量电泳及制胶用的缓冲液（根据电泳需要，配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液），倒入合适三角瓶中。【注意】：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2）根据制胶量及凝胶浓度，加入准确称量的琼脂糖粉（总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量）。
3）在微波炉中加热溶解琼脂糖，设置中火加热至沸腾，保持胶液沸腾约 30s，戴上防热手套，移开三角锥瓶，小心摇动三角锥瓶，重悬未溶解颗粒，再次用高火加热1分钟（或加热直至琼脂糖完全溶解）。请戴上防热手套，小心摇动三角锥瓶，使琼脂糖胶液充分均匀。
【注意】：必须保证琼脂糖充分完全溶解，此时琼脂糖胶液清澈，否则，会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡，停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4）使溶液冷却至60℃左右，如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5µg/ml，并充分混匀。
【注意】：溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时，请戴用手套。建议使用我司提供的EB无毒替代品（YeaRed 核酸染料，Cat# 10202），使用时仅需用制胶缓冲液稀释至1×工作液即可。
5）将琼脂糖溶液倒入制胶模具中，在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5mm之间。
6）在室温下使胶凝固（大约30min-1h），然后放置于电泳槽中进行电泳。
【注意】：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存，一般可保存 2～5天。
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文献和实验的影响，所以回收率并非是一成不变的。所以Qiagen以严谨的态度提供多种条件下的详细介绍：使用QIAquick回收之前和回收之后再混合的DNA 片段 (大小已指出) 。对所有尺寸的片段均获得了接近80％的回收率。A 1-5 : 回收之前; P : 回收之后再混合。样品使用 1.5% 琼脂糖凝胶分析(TAE buffer)。B 1-3: 回收之前; P : 回收之后混合。样品于 3.5% 高分辨琼脂糖凝胶上分析( TAE buffer)。M : pTZ-HinfI marker。记得《分子克隆II
，反应时间在1小时，而反应的终止则由EDTA 溶液的加入完成，因为它能鳌合核酸酶活性所必需的金属离子。 2、DNA的琼脂糖电泳 DNA的电泳有琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺电泳，它们是分离、鉴定和纯化DNA片段的标准方法。 DNA的电泳原理与蛋白质的电泳原理基本相同。DNA分子在电场中通过凝胶介质中而泳动，除电荷效应外，凝胶介质还有分子筛效应，与分子大小及构象有关。由于DNA分子或DNA片段的分子量差别，电泳后呈现迁移位置的差异。琼脂糖凝胶电泳所需样品量仅0.5~1ug
做生物实验的人对琼脂和琼脂糖一定都不会陌生。不过要让你说出它们两者的区别，我想不少人都会支支吾吾。反正不一样呗，培养基用的是琼脂粉，电泳用的是琼脂糖。具体有啥学问，听我一一道来。 先来说说琼脂，它的英文名为agar。这个词来源于马来语的agar-agar，意思是胶状物。中国人亦称为洋菜或冻粉。日本人称之为寒天（kanten），因为它在冬天收获。台湾人叫它菜燕，和燕窝的质感差不多。韩国人的叫法是한
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