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大量
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康朗生物
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20次/50次
选择性凋亡DNA Ladder抽提试剂盒
编号:KL075规格:20次/50次
产品介绍:
凋亡(Apoptosis)或程序性死亡的细胞一个形态学的显著特点是染色质DNA断裂形成长度约为n×180bp(n=1, 2, 3,4…) 的DNA片段, 经琼脂糖凝胶电泳显示为阶梯状凋亡DNA Ladder,是凋亡细胞无可争辩的特征。本试剂盒选择性从组织和细胞中分离提取凋亡DNA Ladder, 通过选择性分离基因组DNA与凋亡DNA Ladder,减少了基因组DNA对凋亡DNA Ladder的观察干扰, 因此显著的提高了检测敏感度, 反应可在微量离心管进行, 3h完成, 快速方便; 无需有机抽提, 检测灵敏度极高, 可从约2000个凋亡细胞中检测到DNA Ladder。
推荐起始细胞量为5×105-10×105个, 但投入的细胞量可在1×105-5×106之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1×104-2×104个凋亡细胞。多于2×104个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA Ladder。本试剂盒也可用于从组织中提取凋亡DNA Ladder。 但与培养细胞相比,整体动物组织凋亡细胞出现的时间、 部位、 程度等规律性差, 取材的量和部位难以掌握, 这些因素会明显影响结果。 但只要组织确实发生凋亡,有经验的用户可以使用本试剂盒从组织提取凋亡DNA Ladder。
注意事项:
• 溴化乙锭染色过度将降低DNA条带检测灵敏度, 可用水冲洗凝胶10-30 min。 如冲洗过头可再用溴化乙锭复染。 可用更灵敏的DNA染色剂SYBR Green。也可进行丙烯酰胺DNA凝胶电泳和DNA银染。
• 对细胞进行干预处理后, 凋亡可能仅在某一时间点或某一干预强度下最为明显。需要进行预试验确定最佳干预时间或强度。此时也可用凋亡小体/Hoeschst染色试剂盒(DE2201)快速染色凋亡小体观察。
• 推荐起始细胞量为5×105-10×105个, 但投入的细胞量可在1×105
- 5× 106之间变化。原则是总细胞中应含有至少约1×104
-2×104个凋亡细胞。多于2×104个凋亡细胞通常可获得十分清晰的凋亡DNA Ladder。六孔板的一个孔相当于一个35 mm培养皿, 长满后可得到1×105-10×105个细胞, 如果细胞凋亡发生率为10%, 经过处理可得到约1×104-10×104个凋亡细胞,应该足以获得清晰的凋亡DNALadder。反之如果不能从>3×106个细胞获得清晰的凋亡DNA Ladder, 表明其中凋亡细胞少于1%。此时增加细胞用量也难以凑效。
• 采用高质量琼脂糖, 使用宽度较小和厚度较窄的样品梳子, 制作较薄的琼脂糖凝胶(厚度约2-4 mm); 用较低的电压进行慢速电泳将显著增加凋亡DNA条带检测灵敏度。 电泳距离不要太长, 否则将使小的凋亡DNA条带弥散而降低分辨率。 多次柱漂洗确保提取的DNA 纯度, 质量稳定可靠, 可适用于各种常规操作, 包括PCR、酶切、测序和Southern杂交等。
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文献和实验real_madrid_146 有个选择性剪接的问题不是很懂,想请教下大家 一个完整的mRNA个外显子,起始密码子在第一个外显子,终止密码子在第十一个外显子。 第二个外显子选择性剪切缺失之后,随后的序列发生移码,终止密码子出现在第三个外显子了,那后面4-11个外显子还能翻译不? 有没有可能后面的外显子内重新出现个起始密码子,也同样翻译? 类似于原核生物的多顺反子那样。
20万元转让DNA抽提系列试剂盒 本试剂盒是由复旦大学博士后研制。考虑到目前国内大多数实验室研究经费的实际情况,我们力求研制出性价比比较高的试剂盒。配方、生产工艺、生产材料经过一系列优化,操作方便、生产设备简单、生产材料价廉。生产成本是目前国内最低的。用该系列试剂盒分离、纯化的DNA纯度不亚于国外同类试剂盒,而且DNA的得率较高。经过三年的销售使用,客户反映该系列试剂盒质量可靠、价格低廉,是目前市场上性价比最高的DNA抽提系列试剂盒。该试剂盒使用率非常高。深受用户欢迎。 本系列试剂盒
选择性转移治疗基因至靶细胞 通过修饰或改造基因传递载体,赋予载体与靶组织或靶器官选择性结合的能力,从而达到将治疗基因选择性转移到靶组织或靶器官的目的。如前所述,反转录病毒载体在感染靶细胞时,需要其外壳蛋白(Env)与细胞表面的受体相互识别,因此可以通过修饰env基因或Env蛋白来改变其感染能力或嗜性。例如采用能识别肿瘤细胞表面受体的配体或针对肿瘤特异性抗原的抗体基因取代env基因部分序列,使病毒表达能特异性识别肿瘤细胞的外壳蛋白,然后将病毒选择性带人靶组织或靶细胞
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